雌激素相关受体α在脂多糖诱导的肺微血管内皮细胞炎症反应的作用

作     者：夏文芳 潘舟 张桓铭 李光 周青山 Xia Wenfang;Pan Zhou;Zhang Huanming;Li Guang;Zhou Qingshan

作者机构：湖北省武汉大学人民医院重症医学科430060 山东省临沂市中心医院重症医学科276400 

出 版 物：《中华急诊医学杂志》 (Chinese Journal of Emergency Medicine)

年 卷 期：2020年第29卷第1期

页      面：65-70页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100215[医学-康复医学与理疗学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金面上项目(81671941)。 

主　　题：脓毒症 雌激素相关受体α NF-κB通路 基因敲低 

摘      要：目的探讨雌激素相关受体α(estrogen-related receptor alpha,ERRα)对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠肺微血管内皮细胞(pulmonary microvascular endothelial cells,PMVECs)炎症反应的影响及其机制。方法体外培养PMVECs细胞株,当细胞处于对数生长期时利用慢病毒转染细胞,并构建稳定低表达的ERRα细胞株。将细胞分别为四组:正常对照组(Ctr组)、正常细胞+LPS处理组(Ctr+LPS组)、shERRα1基因敲低组(shERRα1组)和shERRα1基因敲低组+LPS处理组(shERRα1+LPS组)。予20μg/mL的LPS分别刺激对照组和基因敲低组细胞6、12和24 h后,应用cell counting kit-8(cck-8)检测各组细胞的增殖能力;应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞培养液中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)的浓度,于LPS刺激12 h后采用Western blot检测各组细胞ERRα及NF-κB通路的相关蛋白(p-p65、p65、P-IKBα、IKBα)的表达水平。两组变量比较采用SNK-q检验,多组变量比较采用单因素方差分析,方差不齐时则用秩转换的非参数检验。以P0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比,shERRα1组ERRα蛋白的表达量明显降低(0.09±0.01 vs 0.15±0.01);于LPS刺激6、12和24 h后,与对照组相比,shERRα1+LPS组细胞增殖能力明显降低[(99.68±4.53)%vs(48.62±1.60)%];细胞培养上清液中的TNF-α(ng/mL)、IL-1β(ng/mL)的浓度明显升高,于刺激12 h后变化最为明显(15.76±3.38 vs 5498.91±367.95;14.41±3.86 vs 6014.92±277.33)。同时,shERRα1+LPS组p-p65(0.30±0.5 vs 1.05±0.07)、p-IKBα(0.27±0.04 vs 0.77±0.06)表达量明显升高,而IKBα的表达量明显降低(0.96±0.07 vs 0.14±0.04),差异均具有统计学意义(均P0.05)。结论ERRα基因通过抑制NF-κB信号通路激活,缓解LPS诱导的大鼠肺微血管内皮细胞炎症反应。