新城疫病毒B_(95)株HN蛋白基因的克隆及序列分析

作     者：田兴华 陈燕军 郝勤宗 裘孝良 

作者机构：河北农业大学动物科技学院河北保定071001 中国农科院上海家畜寄生虫病研究所上海徐汇200232 

出 版 物：《中国兽医杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Medicine)

年 卷 期：2003年第39卷第10期

页      面：7-10页

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：上海市科技兴农重点攻关项目 (农科攻字 2 0 0 0 第 5 -0 1号 ) 河北省自然科学基金项目 (3 980 84) 

主　　题：新城疫病毒 B95株 HN蛋白基因 克隆 序列分析 NDV RT—PCR 重组质粒 氨基酸 同源性分析 核苷酸 

摘      要：根据 NDV HN蛋白已知基因序列设计一对引物 ,以提取的澳大利亚布里斯班 NDV分离株 B95基因组 RNA为模板 ,利用 RT- PCR技术扩增得到一条约 1.9kb的条带。将扩增产物克隆到 PGEM- T- easy载体中 ,并对重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,结果证明我们得到了 HN基因的阳性重组子 ,随后采用 Sanger s双脱氧末端终止法对阳性重组子进行核苷酸序列测定 ,获得该基因全长序列 ,并进行同源性分析。 B95株与其他毒株核苷酸同源性为 95 .1%～ 87% ,氨基酸同源性为96 .1%～ 92 .1%。