利用微秒和微纳秒脉冲电场诱导细胞融合

作     者：吴梦 柯强 刘雪芹 肖普英 李成祥 葛良鹏 WU Meng;KE Qiang;LIU Xue-qin;XIAO Pu-ying;LI Cheng-xiang;GE Liang-peng

作者机构：重庆市畜牧科学院重庆402460 农业部养猪科学重点实验室重庆402460 养猪科学重庆市市级重点实验室重庆402460 重庆市医用动物资源开发与转化应用工程技术中心重庆402460 重庆大学电气工程学院重庆400044 

出 版 物：《生物技术》 (Biotechnology)

年 卷 期：2019年第29卷第6期

页      面：551-557页

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：重庆市科研院所绩效激励引导专项(cstc2018jxjl0043) 国家自然科学基金面上项目(5167070727) 重庆市农发资金项目(17406) 

主　　题：微秒 纳秒 复合脉冲 电融合 骨髓瘤细胞 

摘      要：[目的]以小鼠骨髓瘤(SP2/0)细胞作为实验材料,比较了SP2/0细胞在不同微秒(μs)脉冲和微纳秒(μs/ns)复合脉冲电融合的细胞存活率和融合率,并确定了最优的μs/ns复合脉冲电融合参数。[方法]将SP2/0细胞分别用Hoechst 33342和碘化丙啶(PI)进行染色,分别选取3组μs脉冲和3组μs/ns复合脉冲对染色后的SP2/0细胞进行电融合,通过荧光显微镜观察融合后细胞的存活率和融合率。[结果]对比不同μs和μs/ns复合脉冲电融合存活率和融合率结果得知,μs/ns复合脉冲比μs脉冲电融合效果更好,且电融合参数为2.5 k V/cm、20μs、1次,10 k V/cm、200 ns、8次时存活率和融合效率相对最好,存活率和融合率分别为88.5%±6.2%和80.1%±2.6%。[结论]通过采用不同μs和μs/ns复合脉冲电融合比较了SP2/0细胞的存活率和融合效率,结果显示μs/ns复合脉冲电融合参数在2.5 k V/cm、20μs、1次,10 k V/cm、200 ns、8次时,存活率比μs脉冲电融合提高6.4%,融合率提高23.3%,为利用μs/ns复合脉冲研究杂交瘤细胞电融合奠定了基础。