鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子蛋白及其特异性片段的原核表达

作     者：杜春红 王鹏 Tiffany C.Ho 董兴齐 宋志忠 吴锡南 张建中 DU Chun-hong;WANG Peng;Tiffany C.Ho;DONG Xing-qi;SONG Zhi-zhong;WU Xi-nan;ZHANG Jian-zhong

作者机构：云南省地方病防治所云南省鼠疫防控技术重点实验室大理671000 昆明医科大学公共卫生学院 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 

出 版 物：《中国地方病学杂志》 (Chinese Jouranl of Endemiology)

年 卷 期：2012年第31卷第5期

页      面：482-485页

学科分类：0710[理学-生物学] 090603[农学-临床兽医学] 1004[医学-公共卫生与预防医学(可授医学、理学学位)] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 

基　　金：云南省鼠疫防控技术应用基础研究省创新团队 

主　　题：鼠疫耶尔森菌 纤维蛋白溶解酶原激活因子蛋白 原核表达 免疫 

摘      要：目的重组表达鼠疫耶尔森菌纤维蛋白溶解酶原激活因子（Plasminogen activator，PIa）蛋白及其特异性片段并检测其免疫反应性。方法以鼠疫EV76株为模板，PCR扩增pla,pla-c基因，并与质粒原核表达载体（prokaryotic expression vector，pET）32a（＋）连接，将pET32a（＋）-pla、pET32a（＋）-pla—c分别转化***21（DE3）诱导表达；产物经镍离子金属螯合亲和层析纯化，免疫印迹（Westernblot）法鉴定其免疫反应性。结果所表达的Pla蛋白相对分子质量（Mr）为52．8×10。，以包涵体形式存在；Pla—c蛋白Mr为24．0x10s，以可溶形式存在；这两个蛋白质均可与鼠疫免疫血清产生特异结合反应。结论所表达的鼠疫菌Pla及其特异性片段具有免疫反应性，为辅助诊断鼠疫提供了选择。