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斜纹夜蛾Cecropin D成熟肽的原核表达及活性检测

Prokaryotic expression and antibacterial activity of Cecropin D from the common cutworm,Spodoptera litura

作     者:宋杰 陈维春 SONG Jie;CHEN Wei-Chun

作者机构:广东医学院寄生虫学教研室广东湛江524023 广东医学院生物化学与分子生物学研究所广东湛江524023 

出 版 物:《昆虫学报》 (Acta Entomologica Sinica)

年 卷 期:2007年第50卷第12期

页      面:1207-1211页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 07[理学] 

基  金:广东医学院博士启动基金 

主  题:斜纹夜蛾 抗菌肽 融合表达 

摘      要:采用RT-PCR方法从斜纹夜蛾Spodoptera litura脂肪体组织中扩增得到了Cecropin D成熟肽基因序列,分析发现Cecropin D成熟肽与斜纹夜蛾Cecropin B之间存在2个氨基酸残基的差异。将获得的基因序列连接入原核表达载体pGEX-4T-1,并在原核细胞中实现了该蛋白的融合表达。SDS-PAGE结果表明,诱导后的宿主菌比未诱导菌中多出了一条融合蛋白表达带,诱导后1h就可以检测到该蛋白,从诱导后1h到5h该蛋白在表达量上没有明显的差异。生长曲线显示在IPTG诱导后宿主菌的生长受到明显的抑制,纯化后的蛋白对细菌具有一定的抑制作用。

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