EBV-LMP1与HSP90真核双表达质粒的构建及体外表达
Construction of Mammalian Co-expression Plasmid pIRES -LMP1-HSP90 β and Its Expression in vitro作者机构:四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室肿瘤中心 四川大学华西医院耳鼻喉科
出 版 物:《四川大学学报(医学版)》 (Journal of Sichuan University(Medical Sciences))
年 卷 期:2006年第37卷第3期
页 面:339-343页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
主 题:潜伏膜蛋白1 热休克蛋白90β 真核双表达质粒 质粒pIRES 鼻咽癌
摘 要:目的从鼻咽癌组织中克隆EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)与热休克蛋白90β(HSP90β)基因,构建其真核双表达质粒pIRES-LMP1-HSP90β,并检测其在体外的表达。方法提取鼻咽癌组织总RNA,逆转录PCR获得LMP1基因片段和HSP90β基因片段,将二者连接于真核双表达质粒pIRES中,测定序列后,用脂质体包裹转染COS细胞,采用RT-PCR和Westernblot检测LMP1和HSP90β的表达。结果核酸序列测定证实本实验所构建的质粒正确,该双表达质粒在体外转染COS细胞后可表达LMP1和HSP90β分子。结论实验所构建的pIRES-LMP1-HSP90β双表达质粒能在体外同时表达LMP1和HSP90β分子。