白藜芦醇对H9c2心肌细胞抗氧化应激损伤的内质网应激机制研究

作     者：沈志嘉 郑桓 费硕 贺翼飞 李璐 郭静 习瑾昆 SHEN Zhi-jia;ZHENG Huan;FEI Shuo;HE Yi-fei;LI Lu;GUO Jing;XI Jin-kun

作者机构：河北联合大学医学实验研究中心中胸合作中医药实验室唐山市新药基础研究重点实验室唐山063000 河北省滦南县医院滦南063500 

出 版 物：《中国新药杂志》 (Chinese Journal of New Drugs)

年 卷 期：2015年第24卷第1期

页      面：74-78页

学科分类：0710[理学-生物学] 100703[医学-生药学] 1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 071009[理学-细胞生物学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(30900494) 河北省自然科学基金(H2012401019) 河北省高等学校科学技术研究重点项目(ZD2014006) 河北联合大学杰出青年基金项目(JP201302) 

主　　题：白藜芦醇 细胞损伤 内质网应激 糖原合成酶激酶-3β 线粒体通透性转移孔 

摘      要：目的:研究白藜芦醇(resveratrol)对H9c2心肌细胞抗氧化应激损伤的内质网-线粒体对话保护作用并探讨其可能的机制。方法:培养H9c2心肌细胞建立氧化应激模型,随机分为4组:正常组(对照组)、模型组(H2O2组)、白藜芦醇+H2O2组、白藜芦醇组。Western blot测定H2O2对内质网应激(ERS)特征性分子伴侣,即葡萄糖调节蛋白78(GRP 78)、葡萄糖调节蛋白94(GRP 94)的表达;观察白藜芦醇对氧化应激所致GRP 78、GRP 94、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)磷酸化的影响;共聚焦显微镜观察白藜芦醇对氧化应激所致线粒体通透性转移孔(m PTP)开放的影响;电镜观察白藜芦醇对氧化应激所致心肌细胞超微结构的影响。结果:与正常组相比,H2O2(600μmol·L-1)引起H9c2心肌细胞氧化损伤并使GRP 78,GRP 94表达明显增加;白藜芦醇(10μmol·L-1)明显抑制氧化应激所致GRP 78,GRP 94的表达及GSK-3β磷酸化水平。与正常组相比,模型组TMRE荧光强度明显减少,白藜芦醇明显抑制氧化应激所致TMRE荧光强度的减少(即线粒体膜电位减少、m PTP开放)。白藜芦醇明显减少氧化应激所致心肌细胞线粒体、内质网超微结构的损伤。结论:白藜芦醇对氧化应激所致H9c2心肌细胞损伤具有保护作用,该作用可能与抑制ERS使GSK-3β失活,进而阻止m PTP开放有关。