氧化苦参碱抑制胰岛素诱导人结肠癌HT-29细胞的增殖及迁移作用

作     者：潘迪 张雯 张荣 甘诗泉 陈妍 张嫩玲 徐旖旎 沈祥春 PAN Di;ZHANG Wen;ZHANG Rong;GAN Shi-quan;CHEN Yan;ZHANG Nen-ling;XU Yi-ni;SHEN Xiang-chun

作者机构：贵州省天然药物资源高效利用工程中心贵阳550025 贵州医科大学天然药物资源优效利用重点实验室贵阳550025 

出 版 物：《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期：2019年第25卷第24期

页      面：36-42页

核心收录：

学科分类：1006[医学-中西医结合] 1005[医学-中医学] 100501[医学-中医基础理论] 100502[医学-中医临床基础] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：贵州省教育厅青年科技人才成长项目(黔科合KY字149) 贵州省科技厅联合基金项目(黔科合LH字[20167358) 贵州省科技厅社发公关项目(黔科合支撑2840,黔科合LH字2767) 贵州省特色天然药物资源活性研究科技创新团队(黔科合人才团队4025) 贵州省高层次创新型人才培养项目(黔科合人才4029) 贵州医科大学药学国际科技合作基地(黔科合平台人才5802) 遵义医学院基础药理省部共建教育部重点实验开放课题项目(黔教合KY字379) 贵州省科学技术厅基础研究计划项目(黔科合基础1279) 

主　　题：HT-29细胞 氧化苦参碱 胰岛素 细胞增殖 细胞迁移 

摘      要：目的:利用胰岛素培养人结肠癌细胞HT-29,体外模拟糖尿病患者体循环中高胰岛素环境,研究氧化苦参碱(OMT)对胰岛素诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖和迁移的影响。方法:采用噻唑蓝(MTT)比色法和平板克隆实验检测OMT(2,4,8 mmol·L^-1)对胰岛素诱导HT-29的增殖作用,倒置显微镜观察该模型下细胞形态的变化;通过划痕修复实验评价OMT对胰岛素诱导的HT-29迁移能力,流式细胞术Annexin V/碘化丙啶(PI)双染实验检测该模型中HT-29细胞周期与凋亡的变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测细胞周期相关蛋白的表达以及细胞迁移相关蛋白的表达。结果:MTT比色法、平板克隆及划痕修复实验均显示,与空白组比较,胰岛素能促进人结肠癌HT-29细胞的增殖和迁移(P0.05);选择2,4,8 mmol·L^-1OMT处理细胞24 h,与胰岛素组比较,OMT 4,8 mmol·L^-1明显抑制其增殖作用(P0.05),可诱导HT-29细胞发生G0/G1期阻滞(P0.05),8 mmol·L^-1OMT下调细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)表达(P0.05),上调周期负调节蛋白p27水平(P0.05);此外,划痕修复实验结果显示,与胰岛素组比较,OMT各浓度组均能抑制胰岛素诱导的细胞迁移作用(P0.05),其机制可能与增加黏附蛋白(E-cadherin)(P0.05)和降低波形蛋白(Vimentin)(P0.05)相关。结论:OMT能抑制胰岛素诱导的人结肠癌HT-29细胞增殖及迁移作用,其作用机制可能与调控细胞周期及迁移相关蛋白有关。