ApcloxP/loxP+ KrasLSL-G12D/-转基因小鼠模拟人散发性结直肠癌

作     者：黄晓东 郑勇斌 杨玉杰 杨超 黎华丽 程煌荣 Huang Xiaodong;Zheng Yongbin;Yang Yujie;Yang Chao;Li Huali;Cheng Huangrong

作者机构：武汉大学人民医院胃肠外科430060 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2019年第36卷第10期

页      面：1791-1794页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(81372553) 

主　　题：结直肠癌 Apc基因 Kras基因 模型 小鼠 

摘      要：目的构建能模拟人散发性结直肠癌发生发展的ApcloxP/loxP+ KrasLSL-Gl2D/-双转基因小鼠模型.方法将C57 BL/6-Apctm1Tyj/J小鼠(ApcloxP)、B6.129S4-Krastm4Tyj/J(KrasLSL-G12D)小鼠与C57 BL/6小鼠转换遗传背景后再杂交建系,通过聚合酶链反应(PCR)和荧光定量PCR鉴定小鼠及其子代基因型,筛选出基因型为Apclox/loxP+ KrasLSL-G12D/-的双转基因小鼠.将小鼠分为两组C57BL/6J(10只)和ApcloxP/loxP+ KrasLSL-G12D/-(10只),在小鼠结肠镜下向小鼠肠黏膜内注射表达Cre重组酶和Luciferase的慢病毒,通过小动物活体成像系统(IVIS)动态观察小鼠成瘤情况,对小鼠瘤变组织取材进行苏木精-伊红(HE)染色观察其组织病理学变化情况,两组比较采用t检验.结果本研究成功培育出双转基因ApcloxP/loxP+ KrasLSL-G12D/-小鼠品系共24只,实验组与对照组小鼠日龄分别为(62±2)、(63±2)d,差异无统计学意义(t=0.343,P 0.05);两组小鼠体重分别为(21.39±1.40)、(22.35±1.37)g,差异无统计学意义(t=0.682,P0.05).向小鼠肠黏膜内注射慢病毒后,至12周末经IVIS观察及组织病理学证实,ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-组10只中有4只小鼠结直肠发生突变而形成肿瘤病灶,成瘤率40%,而C57BL/6J组小鼠未发生肿瘤.结论本研究成功通过表达Cre酶的慢病毒诱导ApcloxP/loxP+KrasLSL-G12D/-双转基因模型小鼠结直肠发生癌变,较好地模拟了人散发性结直肠癌的发生发展过程.