多样性人源天然噬菌体抗体库的构建及初步应用

作     者：王晋 罗文新 李利峰 陈瑛炜 王明桥 张军 夏宁邵 WANG Jin;LUO Wen-xin;LI Li-feng;CHEN Ying-wei;WANG Ming-qiao;ZHANG Jun;XIA Ning-shao

作者机构：厦门大学细胞生物学与肿瘤细胞工程教育部重点实验室福建省医学分子病毒学研究中心福建厦门361005 

出 版 物：《细胞与分子免疫学杂志》 (Chinese Journal of Cellular and Molecular Immunology)

年 卷 期：2006年第22卷第6期

页      面：786-789,793页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：福建省科技重大项目(2002F013) 国家"十五"创新药物博士基金资助项目(2003AA2Z3539) 福建省自然科学基金资助项目(C031005) 厦门市科技计划项目(3502Z20055002) 

主　　题：人源天然噬菌体抗体库 单链抗体 多样性 

摘      要：目的:构建多样性良好的人源天然噬菌体抗体库。方法:从正常人外周血中分离淋巴细胞,以RT-PCR和半巢式PCR扩增重链可变区VH基因和轻链可变区VL基因,以重叠延伸PCR将VH、VL组装成scFv基因,并将其克隆入噬菌粒载体pCANTAB-5E中。以pCANTAB-5E电转化大肠杆菌TG1,构建人源天然噬菌体抗体库,测序分析抗体基因的家族信息和多样性,并用多种抗原对其进行筛选。结果:获得了库容为2×108的人源天然噬菌体抗体库。分别用5种抗原对其进行筛选,均可获得特异性噬菌体抗体的富集。结论:成功地构建了一个多样性良好的人源天然噬菌体抗体库,可用于制备具有应用前景的人源抗体。