角鲨烯合成酶特异性mU6-siRNA真核表达载体的构建及鉴定

作     者：李文进 袁其朋 李晔 程冰 Li Wenjin;Yuan Qipeng;Li Ye;Cheng Bing

作者机构：北京化工大学生命科学与技术学院北京100029 

出 版 物：《生物技术通报》 (Biotechnology Bulletin)

年 卷 期：2007年第23卷第3期

页      面：115-117,121页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.20576010) 

主　　题：角鲨烯合成酶 RNA干扰 ERG9 辅酶Q10 

摘      要：利用RNA干扰技术靶向构建角鲨烯合成酶基因ERG9特异性真核表达载体。将针对粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe Linder)ERG9不同部位所设计的3对siRNA序列通过重组技术克隆到质粒mU6 pro中构建真核表达重组体mU6 ERG9 siRNA1、2、3,转化DH5α菌株扩增,提取质粒通过限制性酶切和测序分析对重组表达载体进行鉴定,分析结果表明3个表达载体的设计基因插入正确,成功构建了ERG9特异性真核表达载体mU6 ERG9 siRNA,重组体的成功构建为在裂殖酵母细胞中靶向RNA干扰角鲨烯的合成从而提高辅酶Q10合成途径的代谢通量打下基础。