XeCl准分子激光辐照对溶菌酶结构的影响

作     者：倪志华 陈景春 张玉明 葛大勇 赵晓辉 王淑芳 

作者机构：河北大学生命科学学院保定071002 河北大学物理科学与技术学院保定071002 

出 版 物：《生物物理学报》 (Acta Biophysica Sinica)

年 卷 期：2011年第27卷第12期

页      面：1038-1044页

学科分类：071011[理学-生物物理学] 0710[理学-生物学] 07[理学] 

基　　金："973"计划项目(2007CB935700) 

主　　题：激光辐照 溶菌酶 荧光光谱 活性 SDS-PAGE 核磁共振 

摘      要：利用荧光光谱、SDS-PAGE和NMR方法,考察308 nm XeCl准分子激光辐照对溶菌酶结构与活性的影响。使用能量密度为0.3 mJ/mm2的激光辐照溶菌酶,脉冲数分别为25、50、100、200、600、1200、1800、3600和7200。结果表明,用低强度激光辐照(低于200个脉冲)时,溶菌酶的活性出现增高趋势。随着激光辐照脉冲数的进一步增大,溶菌酶的活性又开始逐步降低。激光辐照处理后,溶菌酶的荧光强度发生了与生物活性相对应的先增高再降低现象,说明溶菌酶的高级结构发生了显著变化。SDS-PAGE结果显示,经激光辐照后,溶菌酶出现了分子间的聚合。分析溶菌酶的1H-NMR谱发现,辐照后,溶菌酶色氨酸(Trp)111、Trp63和Trp62的化学位移发生了变化,此结果进一步说明,激光辐照使溶菌酶的高级结构发生了变化。该实验可为激光辐照诱导蛋白质去折叠的研究提供参考。