四川省猕猴桃病毒A外壳蛋白基因的序列分析、原核表达及抗血清制备

作     者：吕蕊 彭期定 杨婷 林宏辉 董家红 席德慧 LüRui;PENG Qiding;YANG Ting;LIN Honghui;DONG Jiahong;XI Dehui

作者机构：四川大学生命科学学院·生物资源与生态环境教育部重点实验室成都610065 云南省农业科学院生物技术与种质资源研究所·云南省农业生物技术重点实验室·农业部西南作物基因资源与种质创制重点实验室昆明650205 

出 版 物：《果树学报》 (Journal of Fruit Science)

年 卷 期：2019年第36卷第9期

页      面：1121-1129页

核心收录：

学科分类：09[农学] 0902[农学-园艺学] 090201[农学-果树学] 

基　　金：国家自然科学基金(31772131) 四川省应用基础研究项目(2019YJ0135) 

主　　题：猕猴桃病毒A 外壳蛋白 序列分析 原核表达 抗血清制备 

摘      要：【目的】研究猕猴桃病毒A(Actinidia virus A,AcVA)的发生及其多样性,为我国猕猴桃产业中AcVA病毒的快速检测、科学防控以及猕猴桃品种选育提供科学依据。【方法】通过巢式PCR从四川省猕猴桃感病叶片中扩增AcVA CP基因序列,进行序列分析和同源性比对;构建AcVA CP基因的原核表达载体,诱导目的蛋白表达后制备抗血清,用Western blot检测效价。【结果】克隆到3个AcVA四川分离株的完整CP基因序列,成功构建了pET28a-AcVA-DJY4-CP重组质粒,原核表达目的蛋白并制备出特异性抗血清,效价达到1∶5 000。【结论】首次获得了3个AcVA四川分离株,丰富了AcVA的序列多样性,并探索了原核表达的最佳条件,制备了高效价抗血清,为今后AcVA病毒的快速检测和防控提供了技术支撑。