LNK基因沉默对THP-1细胞EPO、EPOR表达影响的研究
Effect of Silencing LNK Gene on the Expression of EPO and EPOR in THP-1 Cells作者机构:遵义医学院附属医院小儿内二科
出 版 物:《中国实验血液学杂志》 (Journal of Experimental Hematology)
年 卷 期:2019年第27卷第4期
页 面:1013-1019页
核心收录:
学科分类:1002[医学-临床医学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
主 题:THP-1 淋巴细胞特异性连接蛋白 促红细胞生成素 促红细胞生成素受体
摘 要:目的:探讨LNK基因沉默对人单核细胞白血病细胞(THP-1)EPO、EPOR表达的影响。方法:培养THP-1细胞,以慢病毒为载体介导SiRNA稳定沉默LNK基因,感染72h后在荧光倒置显微镜下观察GFP表达水平;应用流式细胞术检测慢病毒感染效率,RT-PCR验证LNK沉默效应,并检测EPO及EPOR mRNA表达水平;应用Western blot检测LNK、EPO及EPOR蛋白水平。结果:慢病毒感染72h在荧光倒置显微镜下观察GFP表达水平达85%以上,流式细胞术检测感染效率均在99%以上;LNK沉默组LNK、EPO及EPORmRNA表述水平明显低于对照组(P0.05)。LNK沉默组LNK、EPO及EPOR蛋白水平明显低于对照组(P0.05)。结论:成功建立了LNK基因沉默的THP-1细胞株。沉默LNK基因,则EPO及EPOR表达下调,提示LNK可能参与了EPO及EPOR的调控。