猪戊型肝炎病毒ORF2蛋白C端主要抗原表位区的原核表达

作     者：冉旭华 闻晓波 王密 李冬野 侯喜林 RAN Xu-hua;WEN Xiao-bo;WANG Mi;LI Dong-ye;HOU Xi-lin

作者机构：黑龙江八一农垦大学动物科技学院预防兽医学省重点实验室黑龙江大庆163319 

出 版 物：《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第31卷第1期

页      面：24-27页

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：黑龙江省教育厅科学技术研究面上项目(11521201) 

主　　题：猪戊型肝炎病毒 ORF2 主要抗原表位区 表达 

摘      要：利用分子生物学软件分析GenBank公布的猪戊型肝炎病毒DQ1株ORF2的氨基酸序列,确定了其C端抗原性较高的区域,针对此区域设计并合成了一对特异性引物,RT-PCR扩增该区域,并将此片段克隆到原核表达载体pET30a(+)上,命名为pET30a-ORF2C,然后转化大肠埃希菌BL21感受态细胞,1.0 mmol/L IPTG 37℃诱导表达。结果表明,RT-PCR扩增得到301 bp的片段,重组蛋白大小约为18 ku,与预期大小相符。Western blot分析表明,该蛋白与阳性血清发生特异性反应,为进一步利用其建立诊断方法奠定了基础。