博落回提取物中血根碱的离子交换树脂分离纯化工艺研究

作     者：邓霖芳 袁帅 刘江云 DENG Linfang;YUAN Shuai;LIU Jiangyun

作者机构：浙江中医药大学附属第三医院药剂科杭州310005 苏州大学药学院江苏苏州215123 无锡市中医医院药剂科江苏无锡214071 

出 版 物：《中国药房》 (China Pharmacy)

年 卷 期：2019年第30卷第16期

页      面：2226-2231页

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：江苏省重点研发专项资金项目(No.BE2018322) 江苏省第十四批“六大人才高峰”高层次人才资助项目(No.SWYY-167) 浙江中医药大学附属第三医院院级医药卫生科技计划项目(No.ZS17YA01) 

主　　题：博落回 血根碱 离子交换树脂 分离 纯化 

摘      要：目的:建立博落回提取物中血根碱的离子交换树脂分离纯化工艺。方法:采用高效液相色谱法(HPLC)测定博落回提取物中血根碱含量,色谱柱为Cosmosil C18-R-Ⅱ(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为乙腈-0.2%醋酸溶液(25∶75,V/V),流速为1 m L/min,检测波长为270 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。通过静态吸附与解吸附试验,对比8种离子交换树脂对血根碱的吸附和解吸附性能;采用优选离子交换树脂,考察最佳上样液浓度、上样pH值以及上样体积;采用APPS 10D液相制备系统,考察动态洗脱条件,获得博落回精提物溶液;采用反相C18色谱柱对博落回精提物溶液脱盐、洗脱并干燥,获得精制纯化物。采用HPLC法测定所得精制纯化物的纯度,并采用HPLC法、紫外分光光度法、质谱法、核磁共振法分别对其进行结构确证。结果:筛选获得CM-FF型树脂用于博落回提取物中血根碱的分离纯化,以含20%甲醇、0.25 mol/L氯化钠的20 mmol/L醋酸铵溶液100 mL进行洗脱。优化的动态吸附条件为上样浓度6.0 mg/mL、上样pH值5.5、上样体积25 mL;洗脱精提物经脱盐和精制后,最终获得纯度为97%的精制纯化产物(纯化收率为71%),并经结构确证其为血根碱。结论:优选的离子交换树脂分离纯化工艺绿色环保、安全高效、易于操作,可用于博落回提取物中血根碱单体的分离纯化,适合工业化生产。