应用等位基因特异性多重聚合酶链反应同步检测结核分枝杆菌的耐药性

作     者：金嘉琳 张文宏 胡忠义 陈澍 翁心华 

作者机构：复旦大学上海医学院附属华山医院传染科上海200040 上海市肺科医院 

出 版 物：《中华传染病杂志》 (Chinese Journal of Infectious Diseases)

年 卷 期：2005年第23卷第3期

页      面：146-149页

核心收录：

学科分类：100208[医学-临床检验诊断学] 1002[医学-临床医学] 10[医学] 

基　　金：国家"十五"科技攻关计划资助项目(2001BA705B03) 

主　　题：分枝杆菌,结核 异烟肼 利福平 抗药性,微生物 点突变 聚合酶链反应 耐药结核分枝杆菌 等位基因特异性 多重聚合酶链反应 同步检测 

摘      要：目的建立可同步检测结核分枝杆菌katG和ropoB基因突变的等位基因特异性多重聚合酶链反应(MASPCR)的方法,以快速检测结核分枝杆菌对利福平(RFP)和异烟肼(INH)的耐药性。方法根据结核分枝杆菌katG和rpoB基因序列,分别设计特异性寡聚核苷酸引物,采用MASPCR技术,分别检测katG基因315位点和rpoB基因中531、526和516三个最常见的突变位点。结果19株INH敏感株中均未发现katG基因315位点的突变,耐药株中发现有79.2%(61/77)的菌株存在突变;15株RFP敏感株中未发现rpoB基因突变。MASPCR方法可检测出81.5%(66/81)的利福平耐药株。结论MASPCR方法对katG和rpoB基因的同步检测有较高的敏感性和特异性,有望用于耐药结核分枝杆菌的快速检测。