Ad-hBMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞体外骨生成的实验研究

作     者：宁寅宽 李强 蔡伟良 武成聪 陈佳滨 石正松 NING Yingkuan;LI Qiang;CAI Weiliang;WU Chengcong;CHEN Jiabin;SHI Zhengsong

作者机构：桂林医学院附属医院四肢创伤手外科广西桂林541001 

出 版 物：《中国骨质疏松杂志》 (Chinese Journal of Osteoporosis)

年 卷 期：2015年第21卷第3期

页      面：264-268页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 1002[医学-临床医学] 07[理学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31160199) 

主　　题：重组腺病毒 骨形态生发蛋白 骨髓间充质干细胞 扫描电镜 能谱分析 

摘      要：目的观察Ad-h BMP-2/GFP转染兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外骨生成中钙化斑形成,并对钙化斑元素构成进行研究。方法用携带h BMP2和GFP基因的腺病毒转染细胞,通过RT-PCR检测转染后BMSCs h BMP-2基因的表达,通过倒置荧光显微镜、钙结节茜素红染色观察转染后细胞形态改变和钙化斑的形成,结合扫描电镜和X线能谱分析(SEM/EDS)技术观测钙化斑表面微观形貌及其元素构成。结果 RT-PCR检测转染后BMSCs表达h BMP-2目的基因,细胞形态向成骨方向分化,钙结节茜素红染色见红色矿化结节,电镜下见钙化灶点状散布于细胞中,细胞重叠生长,分泌基质旺盛。X射线能谱分析显示其表面为钙、磷沉积物,其钙磷比(Ca/P)为1.53。结论 Ad-h BMP-2/GFP能成功转染兔BMSCs,体外诱导BMSCs向成骨方向分化,并具备较好的骨生成能力。