不同长度poly(C)对口蹄疫病毒基因工程毒的毒力影响

作     者：白兴文 李平花 孙普 李永亮 包慧芳 卢曾军 曹轶梅 郭建宏 刘在新 Xingwen Bai;Pinghua Li;Pu Sun;Yongliang Li;Huifang Bao;Zengjun Lu;Yimei Cao;Jianhong Guo;Zaixin Liu

作者机构：中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室兰州730046 

出 版 物：《微生物学报》 (Acta Microbiologica Sinica)

年 卷 期：2008年第48卷第12期

页      面：1654-1658页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 090601[农学-基础兽医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 0906[农学-兽医学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家“973项目”(2005CB23201) “十一五”国家科技支撑计划项目(2006BAD06A03)~~ 

主　　题：口蹄疫病毒 基因工程毒 poly(C) 毒力 

摘      要：【目的】研究口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus,FMDV)poly(C)区段的序列长度与FMDV毒力之间的关系。【方法】首先利用NheⅠ/NotⅠ线化FMDV pGEM-XJ/AKT/69全长重组质粒,制备体外转录本,借助Lipofectamine 2000转染BHK-21细胞,获得基因工程毒。随后,在细胞传代过程中,收取不同代数病毒培养液,提取总RNA进行poly(C)的长度测定,并进行乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCID_(50)的测定。【结果】我们发现,基因工程毒在BHK-21上连续传代至第6代时,可见明显的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE);在经过一代乳鼠接种之后再重新适应到BHK-21细胞的过程中,poly(C)区段出现了缩短现象;乳鼠致病性试验和BHK-21细胞TCID_(50)测定结果表明,尽管基因工程毒与母本毒相比毒力偏低,但含有不同长度poly(C)的基因工程毒之间并无显著差异。【结论】poly(C)区段的序列长度在12～17个C之间改变对FMDV基因工程毒的毒力无明显的影响。