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反向遗传学技术在新型疫苗研制中的应用

中国预防兽医学报 2012年第10期34卷 841-844页

作者：祁国财李平花刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室/农业部畜禽病毒学重点实验室/国家口蹄疫参考实验室甘肃兰州730046

随着分子生物学等学科的发展，出现了许多可以应用于疫苗研制的新方法和新技术，并在某些方面已经开始逐步取代传统的疫苗研制技术。其中，反向遗传学技术发展迅速，倍受国内外研究者关注。这项技术不仅为解析病毒蛋白在病毒复制周期和... 详细信息

随着分子生物学等学科的发展，出现了许多可以应用于疫苗研制的新方法和新技术，并在某些方面已经开始逐步取代传统的疫苗研制技术。其中，反向遗传学技术发展迅速，倍受国内外研究者关注。这项技术不仅为解析病毒蛋白在病毒复制周期和致病性中的作用提供了有效的研究工具，而且为研发RNA病毒为载体疫苗提供了新的思路和策略。

关键词：遗传学技术载体疫苗应用分子生物学 RNA病毒病毒复制病毒蛋白新技术

口蹄疫病毒结构蛋白VP2-3-1的纯化复性与活性检测

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中国兽医科技 2004年第11期34卷 53-56页

作者：李平花郭建宏刘在新谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所甘肃兰州730046

收集含有口蹄疫病毒结构蛋白VP2 3 1基因的大肠埃希氏菌菌液 ,将其超声破壁 ,用菌体裂解液裂解 ,提取包涵体 ,并用 8mol/L尿素溶解 ,收集上清液 ,用亲和层析法纯化融合蛋白VP2 3 1 ,透析法复性 ,并用间接ELISA检测FMDV阳性血清和阴... 详细信息

收集含有口蹄疫病毒结构蛋白VP2 3 1基因的大肠埃希氏菌菌液 ,将其超声破壁 ,用菌体裂解液裂解 ,提取包涵体 ,并用 8mol/L尿素溶解 ,收集上清液 ,用亲和层析法纯化融合蛋白VP2 3 1 ,透析法复性 ,并用间接ELISA检测FMDV阳性血清和阴性血清。结果 ,P/N值大于 2 .1 。

关键词：口蹄疫病毒结构蛋白 VP2-3-1 纯化复性活性检测

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口蹄疫病毒反向遗传学研究进展

微生物学通报 2009年第1期36卷 106-112页

作者：白兴文李平花刘在新刘湘涛谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室国家口蹄疫参考实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室甘肃兰州730046

反向遗传学操作技术在口蹄疫病毒(FMDV)病原学基础研究领域的应用,使得人们能够在基因组整体水平上研究病毒基因的功能。得益于反向遗传学系统的不断完善和发展,目前人们对FMDV分子病原学也有了更加深入的认识和理解。本文结合实验室在F... 详细信息

反向遗传学操作技术在口蹄疫病毒(FMDV)病原学基础研究领域的应用,使得人们能够在基因组整体水平上研究病毒基因的功能。得益于反向遗传学系统的不断完善和发展,目前人们对FMDV分子病原学也有了更加深入的认识和理解。本文结合实验室在FMDV反向遗传学方向上所开展的探索性研究工作,综述了国内外利用反向遗传学操作技术在研究FMDV分子致病机制、病毒毒力与变异的关系、病毒复制的影响因素、新型FMD基因疫苗的研制等领域所取得的进展,展望FMDV反向遗传学研究新动向。

关键词：口蹄疫病毒反向遗传学感染性分子克隆

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口蹄疫病毒全长cDNA克隆的快速构建

中国兽医科技 2004年第5期34卷 7-10页

作者：方先珍刘光清刘在新李平花谢庆阁中国农业科学院兰州兽医研究所

利用RT PCR和 3′cDNA末端快速扩增 (RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的 2个重叠cDNA片段 ,将其分别插入到载体 pcDNA3.1zeo(+)和pGEM T Easy中 ,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至 pcDNA3.1zeo(+)载... 详细信息

利用RT PCR和 3′cDNA末端快速扩增 (RACE)技术分别扩增出包含口蹄疫病毒(FMDV)全基因组的 2个重叠cDNA片段 ,将其分别插入到载体 pcDNA3.1zeo(+)和pGEM T Easy中 ,然后利用片段本身单一酶切位点将FMDV全长cDNA克隆至 pcDNA3.1zeo(+)载体 ,经PCR扩增、酶切鉴定和序列测定。结果表明 ,重组质粒 (pcDNA3.1/FMDV)

关键词：口蹄疫病毒 cDNA 克隆 cDNA末端快速扩增 RACE 全基因组

房地产土地增值税清算执行中的问题及对策解析

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时代金融 2019年第8期 133-134页

作者：李平花云南涌鑫地产有限公司

房地产行业的繁荣发展,拉动了我国经济的增长,已经成为第三产业中不可或缺的重要组成部分。土地与资金是房地产发展中始终无法回避的两个关键问题,尤其是对于土地增值税的清算执行,不仅关系到企业的长远发展,也是保障房地产企业依法纳... 详细信息

房地产行业的繁荣发展,拉动了我国经济的增长,已经成为第三产业中不可或缺的重要组成部分。土地与资金是房地产发展中始终无法回避的两个关键问题,尤其是对于土地增值税的清算执行,不仅关系到企业的长远发展,也是保障房地产企业依法纳税的重要工作。但是,由于多种因素的限制,导致房地产土地增值税清算执行中依旧存在诸多问题,不利于国家对房地产行业进行规范和约束。本文将针对当前房地产土地增值税清算执行中的问题进行深入分析,探索土地增值税清算执行中问题的解决对策。

关键词：房地产土地增值税清算执行问题对策

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会计核算在房地产企业存在的问题与应对措施

时代金融 2019年第6期 195-196页

作者：李平花云南涌鑫地产有限公司

房地产行业会计核算与其他行业的会计核算相比较,有其特殊性,房地产项目开发周期长,开发流程复杂,投资成本较高,涉及税金种类多,并且税负率非常高,就此,本文就房地产业会计核算存在的问题及应对措施进行探讨,以较少的成本消耗获取最大... 详细信息

房地产行业会计核算与其他行业的会计核算相比较,有其特殊性,房地产项目开发周期长,开发流程复杂,投资成本较高,涉及税金种类多,并且税负率非常高,就此,本文就房地产业会计核算存在的问题及应对措施进行探讨,以较少的成本消耗获取最大化利润,全面提高房地产企业的经济效益。

关键词：房地产会计核算最大化利润经济效益

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当前财政监督工作面临的问题及对策分析

现代营销(经营版) 2021年第3期 172-173页

作者：李平花江西省高安市财政局

我国财政监督工作,是我国行政监督工作中必不可少的一项内容,其所发挥的作用,是任何一项监督工作皆无法代替的。但当前看,我国财政监督工作因各内外环境因素的影响,而受到了一定的掣肘,从而导致其无法将监督工作做到完善且全面。对此,... 详细信息

我国财政监督工作,是我国行政监督工作中必不可少的一项内容,其所发挥的作用,是任何一项监督工作皆无法代替的。但当前看,我国财政监督工作因各内外环境因素的影响,而受到了一定的掣肘,从而导致其无法将监督工作做到完善且全面。对此,本文侧重分析出我国财政监督工作所面临的一系列问题,从而制定有效的策略,对其问题进行解决。

关键词：财政监督问题解决策略

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解析国有企业文保类城市更新项目资金问题

大众投资指南 2024年第6期 66-69页

作者：李平花北京宣房大德置业投资有限公司

国有企业文保类城市更新项目从退租、保护修缮到运营，其间的金融政策、市场资金情况持续变化，企业自身造血能力和资金管理尤为重要。现阶段总结已实施项目实践经验，探索可行的资金支持政策和金融工具创新，构建有效市场和有为政府相... 详细信息

国有企业文保类城市更新项目从退租、保护修缮到运营，其间的金融政策、市场资金情况持续变化，企业自身造血能力和资金管理尤为重要。现阶段总结已实施项目实践经验，探索可行的资金支持政策和金融工具创新，构建有效市场和有为政府相结合的城市空间治理新模式，充分调动国有企业市场化经营积极性，是确保文保类城市更新项目及国有企业可持续发展的重要保障。本文基于笔者所在某国有企业文保区城市更新项目——A项目的经历，通过对项目实施情况的回顾和反思，指出国有企业文保类城市更新项目资金供需特点和存在的问题，并对资金平衡的创新和改进方式进行探讨，以期为类似项目提供借鉴。

关键词：城市更新国有企业资金管理可持续发展

含RGD受体结合位点口蹄疫病毒Asia1/JS/China/2005株的拯救及初步鉴定

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微生物学报 2009年第7期49卷 943-948页

作者：李平花白兴文曹伟军卢曾军孙普殷宏刘在新中国农业科学院兰州兽医研究所家畜疫病病原生物学国家重点实验室农业部畜禽病毒学重点开放实验室国家口蹄疫参考实验室兰州730046 甘肃农业大学动物医学院兰州730070

【目的】构建含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)受体结合位点口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株的全长感染性cDNA克隆。【方法】采用定点突变方法,构建Asia1型FMDV含有预期突变的全长cDNA克隆pFMDV-RGD。pFMDV-RGD重组质粒经NotI线... 详细信息

【目的】构建含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)受体结合位点口蹄疫病毒(FMDV)Asia1/JS/China/2005株的全长感染性cDNA克隆。【方法】采用定点突变方法,构建Asia1型FMDV含有预期突变的全长cDNA克隆pFMDV-RGD。pFMDV-RGD重组质粒经NotI线化后,与表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行FMDV-RGD病毒拯救。【结果】序列测定结果表明成功构建了FMDV含有RGD受体位点的Asia1/JS/China/2005全长cDNA克隆。共转染试验获得拯救病毒,对拯救的病毒分别进行序列测定、间接免疫荧光、电子显微镜观察和乳鼠致病性分析,表明成功拯救了含有RGD受体结合位点的Asia1/JS/China/2005株FMDV。【结论】该试验为进一步研究含有RGD和RDD受体结合位点2个拯救病毒生物学特性的差异奠定了基础。

关键词：口蹄疫病毒 RGD受体结合位点感染性cDNA克隆病毒拯救