登革病毒2型非结构蛋白NS2B的原核表达、纯化及其抗体的制备

作     者：刘丽梅 陈宗涛 田衍平 陈炜 江雯 徐小峰 高娜 安静 LIU Li-mei;CHEN Zong-tao;TIAN Yan-ping;CHEN Wei;JIANG Wen;XU Xiao-feng;GAO Na;AN Jing

作者机构：第三军医大学基础医学部微生物学教研室重庆400038 第三军医大学基础医学部组织胚胎学教研室重庆400038 首都医科大学基础医学院微生物学教研室北京100069 

出 版 物：《免疫学杂志》 (Immunological Journal)

年 卷 期：2008年第24卷第2期

页      面：135-138页

核心收录：

学科分类：1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30471552 30640065 30671853) 

主　　题：登革病毒 Nonstructural Protein 2B(NS2B) 原核表达载体 纯化蛋白 多克隆抗体 

摘      要：目的原核表达登革病毒(Dengue Virus,DV)NS2B蛋白并纯化,制备NS2B的小鼠多克隆抗体。方法RT-PCR扩增DV2全长的NS2B基因序列,构建表达带有6×His标签的NS2B的原核表达载体,进行表达与纯化,免疫Balb/c小鼠,制备NS2B多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,Western-blot及免疫荧光染色检测其特异性。结果成功构建原核表达载体pQE-31/NS2B,进一步获得相对分子质量为16000的纯化蛋白及多克隆抗体,ELISA显示抗体效价达1∶25600。Western-blot和免疫荧光染色显示多克隆抗体与NS2B蛋白特异性结合。结论本研究获得了纯化的DV2NS2B蛋白,成功地制备了NS2B多克隆抗体,为进一步研究NS2B的作用机制奠定了基础。