冷应激条件下猪睾丸细胞中RNA结合基序蛋白3过表达对Caspase 3表达的影响

作     者：李云龙 李俭 李昌盛 李静辉 孟宇 杨焕民 李士泽 LI Yun-long;LI Jian;LI Chang-sheng;LI Jing-hui;MENG Yu;YANG Huan-min;LI Shi-ze

作者机构：黑龙江八一农垦大学生命科学技术学院大庆163319 黑龙江八一农垦大学动物科技学院大庆163319 

出 版 物：《中国应用生理学杂志》 (Chinese Journal of Applied Physiology)

年 卷 期：2016年第32卷第2期

页      面：102-105页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 07[理学] 0713[理学-生态学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31272524) 农业部948计划重点资助项目(2011-G35) 黑龙江省自然科学基金项目(C201103) 研究生创新基金项目(YJSCX2014-Y25) 

主　　题：RNA结合基序蛋白3 冷应激 过表达 猪睾丸细胞系 半胱天冬酶3 

摘      要：目的:探讨冷应激(32℃)条件下,猪睾丸(ST)细胞系中RNA结合基序蛋白3(RBM3)过表达时凋亡蛋白半胱天冬酶3(Caspase 3)表达量变化情况。方法:利用本实验室成功构建的携带绿色荧光蛋白(GFP)的RBM3过表达慢病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-RBM3和空病毒载体pLenti6/V5-GW/EmGFP-DEST分别感染ST细胞,作为过表达病毒(OEV)组和空载体病毒(EVV)组,此外还设立野生型细胞(WTC)组作对照,利用实时荧光定量RCR(qPCR)法和Western blot分析法检测各组中RBM3 mRNA和蛋白的表达情况。然后对各组细胞进行37℃以及32℃(2 h、4 h,8 h)的冷应激处理,利用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测各组Caspase 3表达量的变化。结果:OEV组RBM3基因和蛋白相对表达量高于EVV组和WTC组。在37℃以及32℃冷应激实验(2 h、4 h,8 h)中,OEV组Caspase 3表达量显著低于EVV组和WTC组。结论:冷应激ST细胞中RBM3过表达能够显著地降低Caspase 3的表达程度,为RBM3基因具有抵抗低温诱导ST细胞凋亡作用提供实验依据。