立显蛋白染色液在SDS-PAGE中检测微量蛋白的应用

作     者：王世东 赵墩 胡玉立 周小飞 余兴龙 WANG Shi-dong;ZHAO Dun;HU Yu-li;ZHOU Xiao-fei;YU Xing-long

作者机构：湖南农业大学动物医学院 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2019年第32卷第7期

页      面：803-805页

学科分类：0710[理学-生物学] 0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 07[理学] 100103[医学-病原生物学] 071007[理学-遗传学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(31672539) 

主　　题：立显蛋白染色液 考马斯亮蓝染色液 SDS-PAGE 微量蛋白 

摘      要：目的探讨立显蛋白染色液在SDS-PAGE中检测微量蛋白的应用效果。方法制备SDS-PAGE胶,采用立显蛋白染色液及普通考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue,CBB)染色液,检测定量的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的敏感度及猪细小病毒VP2蛋白、猪蓝耳病病毒N蛋白、猪丹毒杆菌Fe蛋白和猪伪狂犬病病毒gB蛋白基因工程纯化样品的纯度。结果采用立显蛋白染色液染色可识别蛋白质含量为2.5ng的蛋白条带,敏感性高于普通CBB染色40倍。4种蛋白纯化样品经CBB染色后检测纯度均较高,但经立显蛋白染色液染色后,4种纯化蛋白样品均检测出杂蛋白,测定的纯度均有所下降,其中VP2及gB蛋白的纯度有较大幅度下降(分别由83.33%、100%降至51.8%、85.6%)。结论立显蛋白染色液染色SDS-PAGE胶中的蛋白条带敏感性高,快速简便,适用于微量蛋白质的检测。