乙肝病毒X蛋白对肝星状细胞的增殖及其表达TGFβ1和CTGF的影响
Effects of Hepatitis B Virus X Protein on Proliferation of Hepatic Stellate Cells and mRNA Expression of TGFβ1 and CTGF作者机构:福建医科大学 附属协和医院消化科福州350001
出 版 物:《福建医科大学学报》 (Journal of Fujian Medical University)
年 卷 期:2013年第47卷第3期
页 面:127-132页
学科分类:1002[医学-临床医学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100102[医学-免疫学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学]
基 金:教育部高校博士点专项基金(20093518110003) 福建省科技人才基金(2008F3043) 福建省卫生厅青年基金立项医院基金(XH200801) 福建省临床医学重点专科资助项目
主 题:病毒蛋白质类 肝炎病毒 乙型 转化生长因子β 肝细胞 星形细胞 即早蛋白质类
摘 要:目的研究乙肝病毒X蛋白(HBx)对肝星状细胞(HSC)增殖的影响及其可能的分子机制。方法运用分子生物学方法构建稳定表达HBV X基因的HL-7702肝细胞株(L02/x)。RT-PCR、Western blot鉴定L02/x细胞HBV X基因的稳定表达。将HSC细胞分别与L02/x、转染空质粒和未转染的肝细胞共培养36h,分别命名为HSC/x、HSC/ctr和HSC/NC。CCK-8法检测各组HSC增殖,Real-time PCR法检测在HSC增殖中起重要作用的TGFβ1和CTGF基因在各组HSC中的mRNA表达。结果 RT-PCR和Western blot结果显示,L02/x细胞中有HBV X基因mRNA和蛋白的表达。CCK-8法检测显示,HSC/x的增殖(0.737 7±0.014 2)显著高于HSC/ctr(0.497 0±0.008 5)和HSC/NC(0.491 3±0.018 6),差别具有统计学意义(P0.01)。Real-time PCR显示,HSC/x细胞中的TGFβ1和CTGF mRNA相对表达量(3.146 1±0.070 5,2.982 9±0.031 5)均显著高于HSC/ctr(1.004 6±0.004 0,1.022 2±0.062 7)和HSC/NC(1.000 0±0.000 0,1.000 0±0.000 0),差别具有统计学意义(P均0.01)。结论肝细胞中表达的HBV X基因可以上调HSC细胞TGFβ1和CTGF基因的表达,促进共培养的HSC增殖。