HCN1通道基因敲除下调小鼠膀胱Cajal间质细胞中BK通道的表达及功能

作     者：孙碧韶 刘骞 朱景振 龙洲 冯观贵 李龙坤 宋波 Sun Bishao;Liu Qian;Zhu Jingzhen;Long Zhou;Feng Guangui;Li Longkun;Song Bo

作者机构：第三军医大学西南医院全军泌尿外科研究所重庆400038 第三军医大学新桥医院泌尿外科重庆400037 

出 版 物：《第三军医大学学报》 (Journal of Third Military Medical University)

年 卷 期：2015年第37卷第12期

页      面：1281-1287页

核心收录：

学科分类：1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金重点项目(81230017)~~ 

主　　题：ICCs 超极化激活环核苷酸门控阳离子通道 大电导钙激活钾通道 小鼠,基因敲除 膀胱 

摘      要：目的观察小鼠HCN1通道基因敲除对其膀胱Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)中BK通道的表达和功能的影响,探讨这种影响对膀胱兴奋性调控的意义。方法健康清洁成年的野生型C57BL/6J小鼠和HCN1通道基因敲除的C57BL/6J小鼠各48只(雌雄各半)分别记为正常组和敲基因组,反转录PCR(RT-PCR)、荧光定量PCR(Q-PCR)、Western blot和免疫荧光双标检测其膀胱ICCs中BK通道各亚基的表达变化,离体逼尿肌肌条实验检测加入BK通道阻滞剂IBTX前后肌条收缩的变化,激光共聚焦显微镜下检测分别加入BK通道激动剂NS1619、阻滞剂IBTX前后小鼠膀胱ICCs内钙荧光的变化。结果 Q-PCR显示敲基因组小鼠膀胱中BK通道α、β1、β2、β3、β4各亚基表达均降低(P0.01);Western blot显示敲基因组小鼠膀胱中BK通道α、β1、β2、β3、β4亚基表达均降低(其中α、β3、β4:P0.01;β1、β2:P0.05);免疫荧光双标显示敲基因组小鼠膀胱ICCs中BK通道α亚基表达降低(P0.01);离体逼尿肌肌条实验显示加入IBTX后敲基因组和正常组肌条收缩幅度均变大(P0.01,P0.05),且敲基因组肌条收缩幅度的变化值小于正常组(P0.05);激光共聚焦显微镜下可见加入NS1619后两组ICCs内钙荧光均降低(P0.05)、加入IBTX后两组ICCs内钙荧光均增强(P0.01),且不论加入激动剂或阻滞剂,敲基因组加药前后ICCs内钙荧光的变化值均小于正常组(P0.01)。结论小鼠HCN1通道基因敲除下调了其膀胱ICCs中BK通道的表达及功能,这种下调可能是对HCN1通道基因敲除后膀胱收缩减弱的一种代偿。