大鼠睾丸AQP8和绿色荧光蛋白融合蛋白表达载体构建
Reconstruction of aquaporin 8 and green fluorescent protein fusion recombinant vector作者机构:吉林大学基础医学院生殖病理生理研究室吉林长春130021 吉林大学第一医院呼吸内科吉林长春130021 美国加利福尼亚大学医学院美国旧金山ca94122
出 版 物:《吉林大学学报(医学版)》 (Journal of Jilin University:Medicine Edition)
年 卷 期:2006年第32卷第2期
页 面:218-220页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 10[医学]
摘 要:目的:克隆Wistar大鼠睾丸水通道蛋白(AQP8)cDNA,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与大鼠AQP8的融合蛋白真核细胞表达载体。方法:用RT-PCR钓取AQP8 cDNA编码区全长序列,测序鉴定,将AQP8 cDNA亚克隆于pEGFP-C1基因的下游。结果:①AQP8 cDNA测序结果与登录在GenBank上的大鼠AQP8基因序列(GenBank登录号:NM_019158)高度同源,但PCR产物的序列分析结果中发现4个碱基序列与已发表的AQP8序列不同:NM_019158的第135~137位碱基分别是C、A和G,而测序结果缺乏这3个碱基,NM_019158的第311位为A,而测序结果为G;②酶切鉴定在表达载体pEGFP—C1中AQP8cDNA融合于EGFP基因的下游。结论:pEGFP-C1-AQP8融合蛋白的表达载体构建成功。