胸腺素β4对大鼠皮质神经细胞氧糖剥夺-复氧损伤的保护作用研究

作     者：张忠胜 刘双凤 黄四春 Zhang Zhongsheng;Liu Shuangfeng;Huang Sichun

作者机构：广州医科大学附属第六医院(清远市人民医院)神经内科 

出 版 物：《中国脑血管病杂志》 (Chinese Journal of Cerebrovascular Diseases)

年 卷 期：2019年第16卷第6期

页      面：296-302页

学科分类：1002[医学-临床医学] 1010[医学-医学技术（可授医学、理学学位）] 0703[理学-化学] 100204[医学-神经病学] 10[医学] 0702[理学-物理学] 1009[医学-特种医学] 

基　　金：广东省医学科学技术研究基金项目(A2016468) 广东省清远市科技计划项目(2017A022) 

主　　题：胸腺素 细胞凋亡 胸腺素β4 皮质神经元 内质网应激 

摘      要：目的研究胸腺素β4对体外培养大鼠皮质神经细胞氧糖剥夺-复氧(OGD/R)损伤的保护作用及其机制。方法分离并鉴定原代培养的皮质神经细胞,通过OGD/R法建立皮质神经细胞模拟缺血-再灌注损伤模型(氧糖剥夺6h,复氧12h)。实验分为对照组、模型组、治疗组(建模前2h加入胸腺素β4)。CCK8法确定胸腺素β4的最佳作用浓度,流式细胞术和末端脱氧核苷酸转移酶脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western blotting检测78000葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)和Bax的表达水平并进行组间比较。应用SPSS19.0软件分析处理数据,正态分布的计量资料3组间比较采用单因素方差分析。结果大鼠皮质神经细胞被正确分离。胸腺素β4最佳作用浓度为10μg/L。与对照组比较,模型组皮质神经细胞存活率明显下降(P=0.002),细胞凋亡率明显增加(P0.01),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显升高(P值分别为0.034、0、0.045),Bcl-2的表达水平明显下降(P=0.006);与模型组比较,治疗组(10μg/L外源性胸腺素β4)细胞活力明显增高(P=0.008),细胞凋亡率明显降低(P=0.002),GRP78、CHOP、Bax表达水平明显下降(P值分别为0.032、0.027、0.019),Bcl-2表达水平明显升高(P=0.028),差异均有统计学意义。结论胸腺素β4能抑制OGD/R诱导的内质网应激依赖性细胞凋亡,为胸腺素β4在脑缺血-再灌注损伤治疗中的应用提供了理论依据。