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核酸酶I-SceI介导的转基因斑马鱼构建及连接蛋白Connexin48.5的定位研究

I-SceI Meganuclease Mediates Transgenesis in Zebrafish and Connexin48.5 Localization Research

作     者:刘俊 杨镇滔 李汉杰 田书也 韩家淮 LIU Jun;YANG Zhen-tao;LI Han-jie;TIAN Shu-ye;HAN Jia-huai

作者机构:厦门大学生命科学学院细胞应激生物学国家重点实验室福建厦门361005 

出 版 物:《厦门大学学报(自然科学版)》 (Journal of Xiamen University:Natural Science)

年 卷 期:2012年第51卷第6期

页      面:1066-1069页

核心收录:

学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基  金:国家重点基础研究发展计划(973)项目(2009CB22200) 

主  题:I-SceI Connexin48 5 转基因 晶状体 脊索 

摘      要:细胞连接蛋白是由多基因家族编码的一类结构相似、分子质量不同的蛋白质.在细胞膜上,每6个相同或不同的连接蛋白围绕中央孔排列形成一个连接子,相邻细胞膜上的连接子相互对接形成细胞间隙连接,细胞间隙连接是一种重要的通讯连接,它不仅是细胞间代谢偶联、冲动传导的结构基础,而且可以通过介导与细胞的迁移、分化、增生和器官形成有关的信号物质而在胚胎发育中起重要作用.为了进一步探讨细胞间隙连接在生物体中的作用,采用斑马鱼胚胎显微注射核酸酶I-SceI和质粒DNA的方法成功构建了绿色荧光蛋白GFP与细胞连接蛋白Connexin48.5融合表达的转基因荧光斑马鱼品系,并通过对荧光蛋白发光的观察在斑马鱼鱼体中进行连接蛋白Connexin48.5的定位.实验结果表明:核酸酶I-SceI介导下的斑马鱼转基因方法效率较高,可行性好;连接蛋白Connexin48.5在斑马鱼体内主要定位于眼球晶状体和脊索.所获得的Connexin48.5-GFP融合表达斑马鱼系,以及利用该品系进行的Connexin48.5定位研究对细胞连接蛋白在生物体内的功能研究将具有重要作用.

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