反义p38α丝裂原活化蛋白激酶对缺氧复合烧伤血清处理心肌细胞的作用研究

作     者：郑军 黄跃生 黄晓元 范鹏举 贺伟峰 张小容 ZHENG Jun;HUANG Yue-sheng;HUANG Xiao-yuan;FAN Peng-ju;HE Wei-feng;ZHANG Xiao-rong

作者机构：南华大学附属第一医院烧伤整形外科湖南省衡阳市421001 第三军医大学西南医院全军烧伤研究所创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室421001 中南大学湘雅医院烧伤重建外科421001 南华大学附属第一医院整形美容外科湖南省衡阳市421001 

出 版 物：《中华烧伤杂志》 (Chinese Journal of Burns)

年 卷 期：2013年第29卷第3期

页      面：267-271页

核心收录：

学科分类：1002[医学-临床医学] 100210[医学-外科学(含：普外、骨外、泌尿外、胸心外、神外、整形、烧伤、野战外)] 10[医学] 

基　　金：湖南省自然科学基金(05JJ40038) 湖南省卫生厅基金(B2006-114) 湖南省教育厅基金(05C467) 创伤、烧伤与复合伤国家重点实验室开放基金(SKLKF2010026) 

主　　题：烧伤 血清 缺氧 p38丝裂原活化蛋白激酶类 肌细胞,心脏 细胞凋亡 

摘      要：目的研究反义p38aMAPK（以下简称p38ct）对缺氧及烧伤血清复合处理心肌细胞的作用。方法取30只成年SD大鼠制备烧伤血清（背部40％TBSAⅢ度烧伤）。取80只SD大鼠的乳鼠分离、培养心肌细胞，按随机数字表法将细胞分为4组：正常对照组，心肌细胞未经任何处理，常规培养；烧伤血清＋缺氧组，心肌细胞中加人体积分数10％烧伤夫鼠血清后行缺氧培养；烧伤血清＋缺轼＋感染组，采用反义p38“转染的腺病毒感染心肌细胞，再加人体积分数10％烧伤大鼠血清后行缺氧培养；烧伤血清＋缺氧＋空载感染组，用空载腺病毒感染心肌细胞，再加人体积分数10％烧伤大鼠血清行缺氧培养。后3组于缺氧1、3、6、12h后，分别采用RT—PCR法和蛋白质印迹法检测各组心肌细胞p38etmRNA和蛋白表达，采用噻唑蓝法检测细胞活力，检测乳酸脱氧酶（LI）H）含量；于缺氧1、6、12h后，采用膜联蛋白V单染法检测心肌细胞凋亡率。正常对照组行同上检测。每组各时相点没3个复孔。对数据进行单因素方差分析及LSD—t检验。结果（1）缺氧1、3、6h，烧伤血清＋缺氧组p38mRNA表达水平与正常对照组和烧伤血清＋缺氧＋感染组比较均升高，鼠差异有统计学意义（t值为2．725～4．375，P值均小于0，05）。（2）缺氧1、3、6h，烧伤血清＋缺氧组p38a蛋白表达水平与正常对照组和烧伤m清＋缺氧十感染组比较均显著升高（t值为5．351～7．981P值均小于0．01）。（3）缺氧3、6、12h，烧伤血清＋缺氧组心肌细胞活力分别为0．115±0．007、0．104±0．006、0．094±0．005，与正常时照组的0．14l±0．014和烧伤血清＋缺氧＋感染组的0．136±0．009、0，124±0．010、0．112±0．007比较均降低，且差异有统计学意义（t值为2．357～6．812，P值均小于0．05）、（4）缺氧后各时柏点，烧伤血清＋缺氧组IJ）H含量与正常埘照绀和烧伤衄清＋缺氧＋感染组比较均显著升高（t值为22．753～201．273，P值均小于0．01）。（5）缺氧1、6、12h，烧伤血清＋缺氧组心肌细胞凋亡率分别为（5．4±0．7）％、（8．7±1．1）％、（13．6±1．7）％，与正常埘照组的（3．1±0．3）％和烧伤血清＋缺氧＋感染组的（4．3±0．5）％、（5．1±0．7）％、（7．2±0．9）％比较均升高（t值为2．345～9．700，P〈0．05或P〈0．01）。结论反义p38a对烧伤血清＋缺氧损伤条件下心肌细胞具有保护作用。