趋化因子配体18重组成熟肽段的表达

作     者：杨莹珠 王琪 周怡 张玮 黎丹戎 詹步坚 李力 YANG Yingzhu;WANG Qi;ZHOU Yi;ZHANG Wei;LI Danrong;TANG Bujian;LI Li

作者机构：广西医科大学肿瘤医院妇瘤科广西南宁市530021 

出 版 物：《医学分子生物学杂志》 (Journal of Medical Molecular Biology)

年 卷 期：2009年第6卷第3期

页      面：239-242页

学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 08[工学] 100102[医学-免疫学] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金(No.30560157) 广西省自然科学基金(No.桂科自0832230) 广西研究生教育创新计划资助项目(N0.2008105981002M217) 

主　　题：趋化因子配体18 卵巢癌 原核表达 蛋白纯化 

摘      要：目的构建PET SUMO-CCL18原核表达质粒，并表达、纯化获得重组趋化因子配体18成熟肽段。方法从人卵巢癌组织中克隆CCL18基因全长，继而扩增表达成熟蛋白质的核酸序列，连接人PETSUMO载体，重组阳性克隆转入感受态细胞BL21（DE3）中IPTG诱导表达，基质辅助激光解吸／电离质谱技术（MALDI-TOF）验证后以SUMO蛋白酶切除载体部分，纯化浓缩，MALDI-TOF鉴定表达结果。结果测序分析证实，克隆人PETSUMO载体的CCL18序列与Genbank中报道序列完全一致，纯化后蛋白质谱鉴定与天然CCL18成熟蛋白序列一致。结论成功构建了高表达CCL18蛋白的表达系统，得到重组CCL18成熟肽段，为进一步研究CCL18蛋白在卵巢癌中的作用提供实验基础。