高氟暴露降低人血管内皮细胞紧密连接蛋白ZO-1表达及其机制的初步研究

作     者：孙丽艳 王丽华 苑立军 Sun Liyan;Wang Lihua;Yuan Lijun

作者机构：哈尔滨医科大学中国疾病预防控制中心地方病控制中心国家卫生和健康委员会病因流行病学重点实验室黑龙江省普通高校病因流行病学重点实验室150081 哈尔滨医科大学招生就业处150081 

出 版 物：《中华地方病学杂志》 (Chinese Journal of Endemiology)

年 卷 期：2019年第38卷第4期

页      面：288-292页

学科分类：1002[医学-临床医学] 100201[医学-内科学(含：心血管病、血液病、呼吸系病、消化系病、内分泌与代谢病、肾病、风湿病、传染病)] 10[医学] 

基　　金：黑龙江省教育厅面上项目(12511284) 

主　　题：氟 内皮细胞 紧密连接 

摘      要：目的观察高氟暴露对人血管内皮细胞紧密连接胞质带状闭合蛋白1(ZO-1)表达的影响,并初步探讨其机制。方法体外培养人脐静脉血管内皮细胞,采用成组设计,分别设置0.0(对照组)和0.4、0.8、1.2mg/L氟处理组(低、中、高剂量组),以及胰岛素样生长因子-1(IGF-1)组[加入1.2mg/L的氟离子(F-)前,预先加入100nmol/L的IGF-1处理2h],各组细胞培养24h,提取细胞蛋白,应用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测各组细胞中ZO-1、磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)和磷酸化AKT(p-AKT)的表达并进行分析。结果对照,低、中、高剂量组间内皮细胞中ZO-1的表达(0.063±0.002、0.043±0.007、0.039±0.004、0.028±0.007)比较差异有统计学意义(F=21.36,P0.01);各加氟处理组ZO-1的表达均显著低于对照组(P均0.05);高剂量组ZO-1的表达显著低于低、中剂量组(P均0.05)。对照,低、中、高剂量组间内皮细胞中PI3K表达(0.032±0.004、0.031±0.002、0.017±0.001、0.017±0.005)和p-AKT与AKT表达比(p-AKT/AKT:0.745±0.046、0.806±0.007、0.666±0.058、0.641±0.040)比较差异有统计学意义(F=20.38、9.57,P0.01或0.05);其中高剂量组PI3K表达和p-AKT/AKT均显著低于对照组和低剂量组(P均0.05);中剂量组p-AKT/AKT显著低于低剂量组(P0.05)。加入PI3K/AKT通路的激动剂IGF-1后,IGF-1组内皮细胞中ZO-1的表达(0.055±0.015)高于高剂量组(P0.05)。结论高氟暴露可通过PI3K/AKT信号途径引起血管内皮细胞ZO-1的表达降低。