人干细胞因子cDNA的设计、合成与克隆
The design,chemical synthesis and cloning of the human stem cell factor cDNA作者机构：军事医学科学院生物工程研究所北京100850
出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)
年 卷 期：2002年第13卷第1期
页 面：26-29页
学科分类：0831[工学-生物医学工程（可授工学、理学、医学学位）] 0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种]
主 题：人干细胞因子 基因合成 聚合酶链式反应 cDNA 设计 克隆
摘 要：选择大肠杆菌的偏爱密码子,分成18个长约60个碱基且相互配对的寡核苷酸片段,合成了可溶形式的人干细胞因子(hSCF)的cDNA。合成片段经纯化、5 -端磷酸化后,通过PCR进行合成hSCF的cDNA一次性组装与扩增,得到了含有可溶形式的hSCF的全部编码区及EcoRⅠ、SalⅠ位点在内的全长共515个碱基对的DNA片段。回收该DNA片段,酶切消化,定向克隆进质粒pUC19。经酶切鉴定以及序列测定,得到了全序列正确的克隆株,为下一步的工作奠定了基础。
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