虹鳟IPNV分离株VP2蛋白的表达及免疫原性检测

作     者：赵景壮 贺文斌 徐黎明 纪锋 曹永生 胡朝 卢彤岩 ZHAO Jing-zhuang;HE Wen-bin;XU Li-ming;JI Feng;CAO Yong-sheng;HU Chao;LU Tong-yan

作者机构：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所黑龙江哈尔滨150070 四川省都江堰管理局四川都江堰611830 

出 版 物：《大连海洋大学学报》 (Journal of Dalian Ocean University)

年 卷 期：2019年第34卷第2期

页      面：179-185页

核心收录：

学科分类：0710[理学-生物学] 0908[农学-水产] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2018HY-ZD0303) 黑龙江省应用技术研究与开发计划项目(GA13B401) 中国博士后科学基金资助项目(2018M630893) 

主　　题：传染性胰腺坏死病病毒 蛋白表达 VP2蛋白 免疫原性 

摘      要：为充分了解中国鱼类传染性胰腺坏死病病毒的系统进化,对流行病学调查分离出的虹鳟Oncorhynchus mykiss传染性胰腺坏死病病毒(IPNV)分离株进行了系统进化分析,利用软件综合分析了IPNV病毒表面蛋白VP2的跨膜区、亲水性、抗原性和表面可能性,对其特定区段进行了原核表达,并利用表达蛋白制备鼠抗血清及免疫学鉴定。结果表明:本实验室得到的分离株与中国已报道的毒株具有不同的来源;SDS-PAGE分析显示,表达纯化的VP2蛋白为单一条带,相对分子质量约为45 000;ELISA分析显示,利用表达蛋白制备的鼠抗血清与IPNV分离株细胞培养物的效价为1∶20 000,与VP2蛋白的效价为1∶40 000;间接免疫荧光分析显示,细胞感染IPNV病毒24、48 h后,该鼠抗血清均能与IPNV毒株发生特异性反应,并呈现出特异性绿色荧光。研究表明,本研究中表达的VP2蛋白与IPNV病毒的VP2蛋白具有相近的免疫原性,这一结果为IPNV检测方法的建立及疫苗的构建提供了重要的试验依据。