基于In-fusion技术的ERECTA基因植物表达载体的构建

作     者：陈菲帆 王琪琦 钟辉丽 付冰冰 任丹莉 李玉红 

作者机构：西北农林科技大学园艺学院陕西杨凌712100 

出 版 物：《北方园艺》 (Northern Horticulture)

年 卷 期：2015年第18期

页      面：110-115页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(31171955 31471891) 西北农林科技大学优秀人才科研专项资金资助项目(QN2009011) 

主　　题：黄瓜 ERECTA 长片段扩增 In-fusion 表达载体 

摘      要：以黄瓜品种‘长春密刺’(CCMC)为试材,利用高保真酶Iproof及不依赖于酶切的In-fusion技术,构建基于本底启动子驱动的黄瓜ERECTA基因的植物表达载体,以探讨ERECTA基因在黄瓜中的功能,以期为黄瓜抗性性状的遗传改良提供技术支持。结果表明:从CCMC的基因组DNA中克隆的2段gERECTA(DNA序列)长度分别为8 940bp和9 812bp,并分别命名为CsgERECTA-Flag和CsgERECTA-Poly。经过质粒PCR、梯度片段PCR和测序结果的鉴定表明,pCAMBIA3301-gERECTA的2个植物表达载体都已成功构建并转入根癌农杆菌EHA105中。