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花鲈肿瘤坏死因子基因及其在LPS和病毒刺激下表达的研究

Cloning and Expression Analysis of Tumor Necrosis Factor α from Japanese Sea Perch (Lateolabrax Japonicus)

作     者:邱丽华 宋林生 蔡中华 吴龙涛 胥炜 江世贵 

作者机构:中国科学院海洋研究所实验海洋生物学开放实验室,青岛266071 中国水产科学研究院南海水产研究所,广州510300 

出 版 物:《高技术通讯》 (Chinese High Technology Letters)

年 卷 期:2004年第14卷第11期

页      面:81-86页

核心收录:

学科分类:090801[农学-水产养殖] 1002[医学-临床医学] 0908[农学-水产] 09[农学] 100214[医学-肿瘤学] 10[医学] 

基  金:国家高技术研究发展计划(863计划) 

主  题:表达 TNFα基因 LPS 刺激 肿瘤坏死因子 RT—PCR技术 组织内 花鲈 鱼体 虹彩病毒 

摘      要:采用同源克隆和锚定PCR技术,从花鲈(Lateolabrax Japonicus)中克隆到肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNFα)cDNA的全序列。花鲈TNFα的cDNA全长990bp,3′非编码区域(UTR)为192bp,5′UTR为72bp,开放阅读框(ORF)为723bp,可编码241个氨基酸,分子量大约为26kDa。同源性分析表明该序列与其他鱼类甚至哺乳动物的TNFα基因具有很高的相似性,并含有TNF家族的签名序列(signature)。同时,利用RT—PCR技术,对不同刺激下该基因在鱼体内的表达情况进行了初步研究,发现TNFα基因在未受刺激鱼体的头肾和脾脏中有明显的表达。脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)和虹彩病毒(Iridovirus)都可以诱导TNFα基因高水平的表达,但是在不同组织内的表达存在差异。LPS刺激后表达较强的组织是头肾和睥脏,而病毒感染后TNFα在盱脏中的表达较强。研究结果表明花鲈TNFα基因存在组成型和诱导型两种表达调控机制,在抵御病原感染过程中发挥重要作用。

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