Mitsraria sp.1412产壳聚糖酶的分离纯化及性质研究

作     者：尹雅洁 谭光迅 胡远亮 YIN Ya-jie;TAN Guang-xun;HU Yuan-liang

作者机构：湖北师范大学生命科学学院食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室湖北黄石435002 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室湖北武汉430070 

出 版 物：《湖北师范大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hubei Normal University：Natural Science)

年 卷 期：2019年第39卷第1期

页      面：70-75页

学科分类：0710[理学-生物学] 071010[理学-生物化学与分子生物学] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 

基　　金：湖北省教育厅中青年人才项目Q20162501 

主　　题：壳聚糖 壳聚糖酶 分离纯化 酶学性质 SephadexG-200凝胶柱层析 SDS-PAGE凝胶电泳 

摘      要：以实验室选育的Mitsuaria sp.1412菌株发酵产壳聚糖酶,采用硫酸铵分级沉淀,表明沉淀饱和度为60%～90%效果较好,壳聚糖酶纯化倍数达1.85倍。然后依次采用离心超滤、离子交换层析和Sephadex G-200凝胶柱层析进行纯化。SDS-PAGE凝胶电泳检测表明,产物仅有一条清晰的条带,显示该壳聚糖酶的分子量为33.6 kD.酶学性质结果表明,该酶的最适反应pH和温度分别为5.5、50℃,并且该酶在pH5.0～8.0和35～45℃范围内,稳定性良好。酶最大反应速度V_(max)为2.8μmol/min,常数K_m为168.4 mmol/L.对该酶的酶解产物进行分析发现其酶解产物为壳二糖和壳三糖。