一种快速高效的DNA提取方法及其在qPCR检测金黄色葡萄球菌中的应用

作     者：田小兰 冯俊丽 汪艺 TIAN Xiaolan;FENG Junli;WANG Yi

作者机构：浙江工商大学海洋食品研究院杭州310012 浙江省水产品加工技术研究联合重点实验室杭州310012 

出 版 物：《食品科技》 (Food Science and Technology)

年 卷 期：2019年第44卷第2期

页      面：344-350页

学科分类：09[农学] 0903[农学-农业资源与环境] 

基　　金：浙江省科技计划项目(2017C32072) 浙江省自然科学基金青年基金项目(LQ15C200001) 

主　　题：提取DNA PCR检测 金黄色葡萄球菌 热裂解过柱法 灵敏性 

摘      要：探究一种高效快速便捷地提取菌体DNA的方法,并将其应用于金黄色葡萄球菌的定量检测。运用热裂解过柱法和直接热裂解法提取菌体DNA,同时用试剂盒法提取DNA作为对比。用qPCR检测技术对样本DNA的提取效果进行验证,并将最优的提取方法应用于纯培养的和人工污染的鱼样品中金黄色葡萄球菌的检测。qPCR检测结果显示热裂解过柱法仅比试剂盒法低一个梯度,体现了热裂解过柱法良好的稳定性、高效性和实用性。热裂解过柱法可高效提取样品中金黄色葡萄球菌的DNA,结合qPCR技术,其检测灵敏度可达1.04×10~2 cfu/m L。