应用含标记基因K562细胞制备的小鼠白血病模型

作     者：王存邦 白海 葸瑞 钱震 张茜 Wang Cun-bang;Bai Hai;Xi Rui;Qian Zhen;Zhang Qian

作者机构：解放军兰州军区总医院全军血液病中心甘肃省兰州市730050 

出 版 物：《中国组织工程研究与临床康复》 (Journal of Clinical Rehabilitative Tissue Engineering Research)

年 卷 期：2010年第14卷第19期

页      面：3550-3553页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 071007[理学-遗传学] 

基　　金：课题受全军"十一五"杰出人才基金资助项目(06J005) 兰州军区医药科研基金(LXH-2007006)资助~~ 

主　　题：绿色荧光蛋白基因 K562细胞 新霉素磷酸转移酶基因 白血病小鼠模型 Balb/c小鼠 

摘      要：背景：文献报道应用NOD/SCID及SCID小鼠可以建立移植性人白血病小鼠模型,但由于小鼠存在免疫缺陷,使得在自体干细胞移植及移植后相关过继免疫治疗方面的研究受到限制和影响。目的：探索用SPF级Balb/c小鼠和转染GFP及NeoR基因的K562细胞株制备白血病模型的方法。方法：实验分为5组,A、B组和C、D组分别经X射线照射2Gy和3Gy,24h后取对数生长期的K562（GFP＋/Neo＋）细胞,A、C组尾静脉注射2×106个/只;B、D组尾静脉注射5×106个/只;E组为正常对照组。观察小鼠生存时间,进行骨髓细胞及外周血白细胞分类,采用流式细胞仪测定GFP阳性细胞及PCR方法测定Neo基因。结果与结论：实验各组在接种5~7d时发病,分别于30,23,24,17d内全部死亡;生存天均显著短于正常对照组（P〈0.01）。体质量均较正常对照组显著下降（P〈0.05）。小鼠的白血病发病率为100%,无自发缓解。随接种细胞数量的增加和照射剂量的增加,小鼠的存活时间缩短,且外周血及骨髓中白血病细胞所占比例增加。流式细胞仪测定及PCR方法也证实了GFP＋细胞和NeoR基因在肝、脾中的存在。结果证实Balb/c小鼠经照射后从尾静脉注射K562细胞株可以制备获得白血病小鼠模型。