霍乱毒素B亚单位基因的克隆和表达
Cloning and Expression of the Cholera Toxin B Subunit Gene作者机构:中国预防医学科学院流行病学微生物学研究所
出 版 物:《中国医学科学院学报》 (Acta Academiae Medicinae Sinicae)
年 卷 期:1991年第13卷第5期
页 面:332-337页
核心收录:
学科分类:0831[工学-生物医学工程(可授工学、理学、医学学位)] 08[工学]
基 金:863"计划课题
摘 要:用DNA重组技术构建CT-B表达性质粒pXB1及进一步修饰的pXB2,使CT-B基因在大肠杆菌中得到较高水平的表达(280~350ng/ml),且有71.5%分泌率。表达动力学研究阐明,克隆子培养24h产物收率较高。一定浓度的Mg^(2+)、L-组氨酸和天冬酰胺能刺激CT-B的表达。GM1-ELISA、CHO细胞测毒结合间接免疫荧光检测和家兔肠段结扎试验证实,表达的CT-B能与游离的或活细胞膜上的GM1受体结合,但无细胞和肠段毒性。这种细胞测毒结合免疫荧光序贯试验,为客观证实CT-B的生物学活性开拓了新途径。