HCV核心蛋白在酵母双杂交系统中的表达及自激活作用检测
Role of HCV core protein in yeast two-hybrid system in reporter gene expression and activation作者机构:西安交通大学医学院第一附属医院传染科陕西西安710061 第四军医大学基础部微生物学教研室陕西西安710033
出 版 物:《第四军医大学学报》 (Journal of the Fourth Military Medical University)
年 卷 期:2006年第27卷第3期
页 面:241-244页
学科分类:1007[医学-药学(可授医学、理学学位)] 100705[医学-微生物与生化药学] 1001[医学-基础医学(可授医学、理学学位)] 100103[医学-病原生物学] 10[医学]
基 金:国家自然科学基金(30471532) 陕西省科学技术研究发展计划项目(2004K15-G1)
摘 要:目的检测用含丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白的cDNA片段构建的酵母双杂交诱饵载体的表达产物对酵母细胞有无毒性作用及对报告基因有无激活作用.方法PCR扩增含HCV核心蛋白不同大小的cDNA片段,分别克隆入pUC19质粒,经测序正确后,再分别亚克隆入酵母双杂交诱饵载体pGBKT7中.将重组质粒导入酵母菌AH109,检测其表达产物在酵母细胞中对报告基因有无激活作用.结果成功获得含HCV核心蛋白的cDNA片段,HCV核心蛋白对酵母菌AH109无毒性,且对报告基因无激活作用.结论利用酵母双杂交Gal4系统3研究与HCV核心蛋白相互作用的蛋白,证实了HCV核心蛋白无自激活功能.