基于双向位点特异性PCR的金银花真伪鉴别方法研究

作     者：蒋超 张雅华 陈敏 袁媛 林淑芳 吴志刚 

作者机构：中国中医科学院中药研究所北京100700 

出 版 物：《中国中药杂志》 (China Journal of Chinese Materia Medica)

年 卷 期：2012年第37卷第24期

页      面：3752-3757页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 10[医学] 

基　　金：国家自然科学基金项目(81001605) 中药制药过程新技术国家重点实验室开放基金项目(SKL2010M0101) 

主　　题：双向位点特异性PCR 金银花 分子鉴定 

摘      要：目的:筛选获得金银花真伪鉴别SNP位点并建立双向位点特异性PCR方法,用于鉴别金银花和其常见伪品以及两者的混杂品。方法:通过对GenBank收录的忍冬属植物叶绿体trnL-trnF序列进行对比分析,获得金银花真伪鉴别SNP位点;并依据该SNP位点设计特异性引物,对84份金银花基原植物及其市售饮片、伪品进行双向位点特异性PCR扩增,并根据真伪品的特异性条带进行金银花药材鉴别。结果:退火温度为61℃时,正品均出现468 bp的条带,红腺忍冬、华南忍冬、灰毡毛忍冬、黄褐毛忍冬、水忍冬、金银忍冬、郁香忍冬、新疆忍冬、繁果忍冬等9个伪品均出现324 bp的条带,在正品DNA中掺入5%以上伪品时同时出现正品和伪品条带。结论:双向位点特异性PCR可以鉴别金银花真伪品及两者的混杂样品。