利用Cre/lox重组系统获得烟草TA29-Barnase基因工程雄性不育恢复系
Construct the Restoring Line of Tobacco Engineered Male Sterile Line Induced by TA29-Barnase GeneUsing Cre/lox Site-specific Recombination System作者机构:重庆市蔬菜学重点实验室西南大学园艺园林学院 华南农业大学园艺学院
出 版 物:《农业生物技术学报》 (Journal of Agricultural Biotechnology)
年 卷 期:2010年第18卷第3期
页 面:468-475页
核心收录:
基 金:国家自然科学基金(30200185) 重庆市科委应用基础项目(渝科计字200217)共同资助
主 题:TA29-Barnase雄性不育基因 Cre/lox重组系统 雄性不育 育性恢复 烟草
摘 要:结合F1杂种的生产原理,利用Cre/lox重组系统,建立了一种完全有别于Barnase/Barstar恢复途径的基因工程雄性不育恢复系。将TA29-Barnase雄性不育基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与Bar基因融合后获得植物表达载体pBinBarloxTABn,通过农杆菌介导的叶盘转化法将其转入Wisconsin38烟草获得了雄性不育转基因烟草植株。雄性不育转基因植株表现花药瘦小,不饱满,花粉量明显偏少,花粉畸形、皱缩、塌陷、极少萌发,自交无法正常座果结子。TA29-Barnase雄性不育转基因植株用来自pBinCre转基因植株的花粉授粉后则能正常结果结子。分别从pBinCre转基因植株C1与转基因雄性不育植株BN1、BN6杂交后代中筛选到23株、22株Kan和PPT双抗性植株,分子检测结果显示两个杂交组合后代中凡同时含Cre基因和Bar基因的F1植株,其TA29-Barnase雄性不育基因均被删除,删除效率达到100%。F1植株中的TA29-Barnase基因被删除后,育性被恢复,能正常开花结果。