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石斛总DNA的提取及鉴定

中国中药杂志 2003年第12期28卷 1129-1131页

作者：彭锐宋洪元李泉森王宇重庆市中药研究院重庆400065 西南农业大学园艺系重庆400716

目的 :探讨不同DNA提取方法对石斛属DNA质量及分子标记结果的影响。方法 :对提取的DNA进行紫外光谱分析、总DNA电泳及RAPD分析。结果 :不同方法提取的DNA质量及产率存在显著差异 ,对RAPD结果影响很大。结论 :石斛属植物在DNA提取前加入... 详细信息

目的 :探讨不同DNA提取方法对石斛属DNA质量及分子标记结果的影响。方法 :对提取的DNA进行紫外光谱分析、总DNA电泳及RAPD分析。结果 :不同方法提取的DNA质量及产率存在显著差异 ,对RAPD结果影响很大。结论 :石斛属植物在DNA提取前加入无CTAB缓冲液抽提多糖等杂质 ,可获得较高质量的DNA。

关键词：总DNA 提取鉴定石斛属紫外光谱

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芥菜农杆菌高效遗传转化体系初步建立

华南农业大学学报 2003年第4期24卷 48-51页

作者：曹必好雷建军宋洪元秦耀国华南农业大学园艺生物技术所广东广州510642 西南农业大学园艺系重庆400716

采用农杆菌导入法,探讨了影响芥菜农杆菌遗传转化效率的因素,优化了参数,初步建立了以MS+6 BA(2 0mg/L)+NAA(0 2mg/L)为分化培养基,预培养时间3或4d,共培养时间4d,农杆菌浓度D600nm为0 5,浸菌时间10min,筛选压Kan为25mg/L的遗传转化体系.

关键词：芥菜农杆菌遗传转化体系参数中国基因

链脲佐菌素诱导的小鼠糖尿病视网膜病变模型的构建

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第二军医大学学报 2018年第12期39卷 1360-1363页

作者：高鑫宋洪元沈炜海军军医大学(第二军医大学)长海医院眼科上海200433

长期以来,链脲佐菌素(STZ)被广泛用于诱导多种动物的糖尿病视网膜病变(DR)模型。STZ诱导的动物DR模型的临床特征和病理变化与人1型糖尿病的DR相似,经常被用来研究DR的发病机制及进行新型抗DR药物的临床前评估。小鼠体型小、动物成本低... 详细信息

长期以来,链脲佐菌素(STZ)被广泛用于诱导多种动物的糖尿病视网膜病变(DR)模型。STZ诱导的动物DR模型的临床特征和病理变化与人1型糖尿病的DR相似,经常被用来研究DR的发病机制及进行新型抗DR药物的临床前评估。小鼠体型小、动物成本低、容易操作及诱导成功率高,是研究DR的最佳模型动物之一。建立小鼠DR模型时仍存在许多问题,例如模型的再现性以及STZ的动物致死性等。通过查阅文献发现,在使用STZ构建动物DR模型时,应当注意几个关键因素,如STZ的制备、给药剂量、给药途径、饲养方式,各类动物的年龄、体质量和性别等。本综述分析了STZ致DR的机制,指出了STZ诱导小鼠DR模型的关键环节,介绍了降低STZ致死率的方法。

关键词：链脲佐菌素糖尿病糖尿病视网膜病变动物疾病模型小鼠

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豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化芥菜及抗虫鉴定

中国生物化学与分子生物学报 2003年第6期19卷 731-735页

作者：杨朝辉宋洪元何凤田第三军医大学生物化学与分子生物学研究室重庆400038 西南农业大学园艺系重庆400076

用农杆菌介导将豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因导入芥菜 ,获得了Kan抗性植株 .经PCR扩增、PCR Southern印迹和Northern印迹分析 ,转化再生植株大部分呈阳性 ,而非转化的再生植株均为阴性 ,证明CpTI基因已存在于芥菜基因组中 .在室内进... 详细信息

用农杆菌介导将豇豆胰蛋白酶抑制剂 (CpTI)基因导入芥菜 ,获得了Kan抗性植株 .经PCR扩增、PCR Southern印迹和Northern印迹分析 ,转化再生植株大部分呈阳性 ,而非转化的再生植株均为阴性 ,证明CpTI基因已存在于芥菜基因组中 .在室内进行了喂虫试验 ,结果表明转基因芥菜抗虫性明显高于对照。

关键词：豇豆胰蛋白酶抑制剂基因转化芥菜抗虫鉴定农杆菌介导

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植物花青素生物合成转录调控研究进展

南方农业学报 2014年第8期45卷 1375-1379页

作者：梁平宋洪元西南大学园艺园林学院重庆400715

花青素是高等植物中发现的一种次生代谢物,能够决定花和果实的颜色,保护植物免受各种生物和非生物胁迫损伤。花青素生物合成由一系列结构基因编码的酶催化完成,属于类黄酮途径一个特异分支,其合成结构基因的表达受由MYB、bHLH和WD40 3... 详细信息

花青素是高等植物中发现的一种次生代谢物,能够决定花和果实的颜色,保护植物免受各种生物和非生物胁迫损伤。花青素生物合成由一系列结构基因编码的酶催化完成,属于类黄酮途径一个特异分支,其合成结构基因的表达受由MYB、bHLH和WD40 3类转录因子组成的MBW(MYB-bHLH-WD40)转录复合体协同调控。文章主要就MYB、bHLH和WD40 3类转录因子在调节结构基因表达和花青素合成中的功能和作用进行综述。

关键词：花青素生物合成转录因子结构基因调控基因协同调控

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超量表达DWF4基因对芥菜生长发育的影响

西南大学学报（自然科学版） 2021年第12期43卷 26-37页

作者：兰彩耘宋洪元重庆市江津区现代农业园区发展中心重庆江津402260 西南大学园艺园林学院重庆400715

为研究DWF4基因在芥菜生长过程中的作用与功能,也为今后开发生物技术手段调控植物生长发育奠定理论基础,通过农杆菌介导转化法将DWF4基因导入芥菜中,结果显示:转基因芥菜植株生长迅速,生长势旺盛,其叶、花等器官都大于对照野生型.转基... 详细信息

为研究DWF4基因在芥菜生长过程中的作用与功能,也为今后开发生物技术手段调控植物生长发育奠定理论基础,通过农杆菌介导转化法将DWF4基因导入芥菜中,结果显示:转基因芥菜植株生长迅速,生长势旺盛,其叶、花等器官都大于对照野生型.转基因植株成长过程中,其株高、开展度、最大叶宽、最大叶长都显著高于野生型,且植株抽薹时间和开花时间提前.pCA BarDWF4转基因芥菜植株与野生型植株相比,主枝更长,分枝更多,总种荚数增多,总种子数增多,种荚率更高.对pCA BarDWF4转基因芥菜植株定量PCR分析结果显示:植株体内油菜素甾醇(Brassinosteroids,BR)合成途径相关基因表达增高.结果表明:DWF4基因能促进植株内源BR的生成,因此促进了植株的生长发育.

关键词：芥菜产量 DWF4基因

利用Cre/lox定位重组系统获得无选择标记GFP转基因烟草

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中国农业科学 2008年第10期41卷 2973-2982页

作者：宋洪元任雪松司军李成琼宋明西南大学园艺园林学院/重庆市蔬菜学重点实验室

【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Bast... 详细信息

【目的】利用Cre/lox系统具有的特异重组特性,以绿色荧光蛋白GFP为目的基因,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【方法】将Bar基因表达盒置于两个同向lox位点之间并与GFP基因表达盒融合后获得相应植物表达载体,转化烟草后获得抗除草剂Basta的GFP转基因植株。GFP转基因植株叶盘二次转化导入重组酶Cre基因后,实现与GFP基因连锁的Bar基因表达盒剔除,剔除Bar基因的植株开花后自交使重组酶Cre基因分离,获得无选择标记的GFP转基因烟草。【结果】将含Bar基因表达盒以及GFP基因表达盒的植物表达载体转化烟草Wisconsin38后获得了抗除草剂Basta以及GFP荧光表达的转基因植株。随机抽取5株转基因植株二次转化导入Cre基因,所获得的再生植株叶盘进行Basta的抗性检测,绝大多数单株对应叶盘在含8mg·L-1PPT(phosphinothricin)的筛选培养基上无法再生死亡,删除效率在76%～100%。对Bar基因删除后区域片段进行克隆测序分析显示,Bar基因表达盒已经被精确删除。Bar基因删除植株开花后自交,获得的自交后代进行NPTⅡ抗性检测,NPTⅡ敏感植株分子检测显示均只含有GFP基因。【结论】利用Cre/lox系统获得烟草无选择标记的转基因植物是稳定可行的,可广泛应用于其它无选择标记转基因植物的培育。

关键词： Cre/lox定位重组系统无选择标记转基因烟草绿色荧光蛋白转基因

热胁迫下甘蓝细胞膜叶绿体线粒体超微结构研究

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西南农业大学学报（自然科学版） 2001年第6期23卷 542-543页

作者：向珣宋洪元李成琼西南农业大学农业部南方蔬菜遗传育种与栽培重点开放实验室重庆400716

研究了热胁迫下 ,不同抗热性甘蓝叶片细胞的细胞膜、叶绿体及线粒体结构。结果表明 ,抗热性材料在细胞膜及叶绿体结构上较热敏材料更完整 ,可作为抗热性鉴定标准之一 ;材料间在线粒体结构上则未发现有明显差异。

关键词：甘蔗热胁迫超微结构细胞膜叶绿体线粒体