牛乳铁蛋白的酶联免疫吸附分析(ELISA)方法的建立

作     者：林成招 张彦明 邹思湘 陈伟华 

作者机构：南京农业大学动物医学院 农业部动物生理生化重点开放实验室 

出 版 物：《中国乳品工业》 (China Dairy Industry)

年 卷 期：2003年第31卷第4期

页      面：44-46页

学科分类：0832[工学-食品科学与工程（可授工学、农学学位）] 08[工学] 083203[工学-农产品加工及贮藏工程] 

主　　题：牛乳铁蛋白 酶联免疫吸咐分析法 检测 多克隆抗体 食品 

摘      要：用牛乳铁蛋白(Bovine Lactoferrin,BLf)、纯品免疫新西兰白兔制得兔抗BLf的多克隆抗体,琼扩效价最高为1:64。经ELISA方法检测,该抗体与牛乳中的主要蛋白质:α-乳清蛋白、β-乳球蛋白、血清白蛋白以及酪蛋白之间不存在免疫交叉性,说明抗体特异性良好。以BLf纯品为包被抗原,自制抗体为一抗,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔IgG为二抗,邻苯二胺(OPD)为底物,建立了BLf的竞争抑制性ELISA方法。包被抗原及抗体的浓度均由方阵稀释实验确定。所建立的ELISA方法孔间误差1.6％,板间误差4.3％,灵敏度25μg/L,检测范围25～800μg/L。标准曲线线性方程(Logit)Y=-1.488 lg C+3.811 6,相关系数R=0.990。