高效液相色谱法分析胞内S-腺苷-L-甲硫氨酸含量及其合成酶活性的优化研究

作     者：姚高峰 秦秀林 储炬 钱江潮 YAO Gao-feng;QIN Xiu-lin;CHU Ju;QIAN Jiang-chao

作者机构：华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室上海200237 

出 版 物：《化学与生物工程》 (Chemistry & Bioengineering)

年 卷 期：2011年第28卷第6期

页      面：83-86,91页

学科分类：081703[工学-生物化工] 081704[工学-应用化学] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-化学工程与技术] 070302[理学-分析化学] 0703[理学-化学] 0836[工学-生物工程] 082203[工学-发酵工程] 0822[工学-轻工技术与工程] 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(20976050) 

主　　题：S-腺苷-L-甲硫氨酸 S-腺苷-L-甲硫氨酸合成酶 高效液相色谱 

摘      要：对重组毕赤酵母胞内S-腺苷-L-甲硫氨酸（SAM）含量以及SAM合成酶活性的高效液相色谱（HPLC）测定方法进行了优化。通过调整流动相浓度和洗脱程序,建立了保留时间适中、分离效果好的SAM定量分析方法。结果表明,SAM浓度在0.05~0.5 g.L-1时,其峰面积与浓度线性关系良好,相关系数为0.99996,平均回收率为99.3%~100.5%,相对标准偏差为0.72%~0.98%。该方法对胞内以及酶活测定液中的SAM能够进行有效分离,精密度高、稳定性好,能高效、准确地分析发酵过程菌体中SAM含量以及SAM合成酶活性。