中国春小麦puroindoline a基因的克隆及其真核表达载体的构建

作     者：陶红梅 罗立廷 朱婷婷 杨广笑 何光源 TAO Hong-mei;LUO Li-ting;ZHU Ting-ting;YANG Guang-xiao;HE Guang-yuan

作者机构：华中科技大学中英HUST-RRes基因工程和基因组学联合实验室湖北武汉430074 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2007年第18卷第3期

页      面：398-400页

学科分类：0710[理学-生物学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点基础研究发展规划项目(2002CB111301) 国家自然科学基金项目(30370807) 

主　　题：puroindoline a 中国春小麦 基因克隆 真核表达载体 

摘      要：目的:puroindoline(pin)基因在控制麦类作物的籽粒硬度中起着重要作用。构建真核表达载体pcDNA3.1(+)-pina-gfp,为pina基因在哺乳细胞中的表达提供基础。方法:利用PCR方法从中国春小麦基因组中克隆到了pina基因,将其插入真核表达载体pcDNA3.1(+)-gfp,用PCR和酶切鉴定重组子。结果:PCR和酶切鉴定表明,所构建的真核表达重组质粒为pcDNA3.1(+)-pina-gfp;将该片段克隆到pCF-T载体中,经测序验证,表明其为目的基因。结论:构建的pina基因真核表达载体pcDNA3.1(+)-pina-gfp为pina基因在哺乳动物细胞中的表达提供了基础。