克氏原螯虾ISSR体系优化
Optimization of ISSR-PCR System in Procambarus clarkia作者机构:重庆文理学院生命科学与技术学院重庆402168 武汉大学生命科学学院武汉430072 湖北省水产科学研究所武汉430071
出 版 物:《中国农学通报》 (Chinese Agricultural Science Bulletin)
年 卷 期:2010年第26卷第21期
页 面:432-435页
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 071007[理学-遗传学] 090501[农学-动物遗传育种与繁殖]
基 金:国家科技支撑计划资助项目"长江中游地区特色水产品高效生产关键技术研究与示范"之课题"克氏原螯虾高效无公害生产关键技术研究与示范"(2007BAD37B01)
摘 要:为了获得最佳的克氏原螯虾ISSR-PCR反应体系,采用单因素实验法将反应体系的Taq聚合酶、dNTPs和Mg2+3个主要因素设定5个梯度,根据每个因素量的变化对扩增结果产生的影响进行了研究,最后确定最佳反应体系为:总体积10μL,1μL10×TaqBuffer、dNTPs浓度0.6mmol/L、0.6U Taq DNA polymerase、MgCl2浓度1.8mmol/L、20ngDNA,引物浓度0.8μmol/L。