硫化氢在肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障功能障碍中的作用

作     者：闫兴军 卢根林 邓勇 YAN Xing-jun;LU Gen-lin;DENG Yong

作者机构：浙江省义市乌中心医院普通外一科322000 青海大学附属医院普通外二科 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2010年第27卷第1期

页      面：71-74页

核心收录：

学科分类：1008[医学-中药学(可授医学、理学学位)] 1006[医学-中西医结合] 100602[医学-中西医结合临床] 10[医学] 

基　　金：青海大学医学院中青年科学基金资助项目(2006-kj-f-02) 

主　　题：肠黏膜 缺血 再灌注损伤 硫化氢 脱噬作用 

摘      要：目的 观察硫化氢（H_2S）在肠缺血.再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障功能障碍中的作用.方法 雄性Wistar大鼠24只,分为S（假手术）组、Ⅰ（缺血-再灌注）组,N（缺血-再灌注＋NaHS）组（n=8）,N组在再灌注前10 min静脉注射100 μmol/kg NaHs后按每小时1 mg/kg持续静脉注射直到再灌注2 h,S和Ⅰ组静脉注射相同体积的生理盐水.采用改良的酶学分光光度法测定血浆D-乳酸水平,采用分光光度法检测小肠黏膜超氧化物歧化酶（SOD）和髓过氧化物酶（MPO）、丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XO）水平,敏感硫电极法检测硫化氢（H_2S）浓度.电镜下观察肠黏膜形态学改变,TUNEL染色观察小肠上皮细胞凋亡指数（AI）,逆转录.聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小肠黏膜组织胱硫醚-γ-裂解酶（CSE）、胱硫醚-β-合酶（CBS）、多聚ADP核糖合成酶（PARP）和细胞凋亡蛋白酶（Caspase）-3 mRNA的表达,蛋白质印迹法检测小肠黏膜PARP和Caspase-3蛋白水平.结果 N组D-乳酸含量、AI分别为（2.35±0.26）mg/L、（24.41±2.76）%,低于Ⅰ组、高于S组（P〈0.01）,两者正相关（r=0.892,P〈0.01）;N组MDA、XO分别为（9.17±0.35）nmol/mg、（9.94±0.41）U/g,低于Ⅰ组、高于S组（P〈0.01）,两者正相关（r=0.995,P〈0.01）;N组CSE mRNA、H_2S、SOD、MPO分别为（0.33±0.02）μmol/L、（35.27±3.14）μmol/L、（8.83±0.29）U/mg、（5.95±0.49）U/mg;N组CSE mRNA、H_2S、SOD水平均低于S组（P〈0.01）,N组H2S、SOD水平均高于Ⅰ组（P〈0.01）,N组MPO水平高于S组、低于Ⅰ组（P〈0.01）;N组活化的Caspase-3、PARP蛋白表达量分别为11.50±1.25、9.37±1.18,高于s组、低于Ⅰ组（P〈0.01）,两者正相关（r=0.785,P〈0.01）.结论 H_2S对肠缺血再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障功能障碍有保护作用,其机制之一是减少中性粒细胞浸润和激活、肠上皮细胞氧化损伤水平,增加SOD清除氧自由基的活性,下调活化的Caspase-3和PARP蛋白表达.