山羊脂肪酸合酶基因(FASN)启动子结构与功能的初步分析
Structural and Functional Analysis of Fatty Acid Synthase Gene Promoter of Goat作者机构:西北农林科技大学动物科技学院陕西省农业分子生物学重点实验室杨凌712100 南京农业大学动物科技学院南京210095
出 版 物:《畜牧兽医学报》 (ACTA VETERINARIA ET ZOOTECHNICA SINICA)
年 卷 期:2012年第43卷第2期
页 面:204-210页
核心收录:
学科分类:0710[理学-生物学] 07[理学] 0905[农学-畜牧学] 09[农学] 071007[理学-遗传学]
基 金:转基因生物新品种培育项目(2009ZX08009-162B) 国家自然基金项目(31072013) 公益性行业(农业)科研专项经费项目(201103038)
摘 要:本研究旨在对山羊脂肪酸合酶基因(Fatty acid synthase,FASN)启动子进行结构与功能的初步分析,进而对其转录调控机制进行探讨。采用PCR技术从西农萨能羊基因组DNA中克隆FASN基因启动子,通过缺失分析,构建7个包含不同缺失片段的荧光素酶报告基因载体,转染山羊乳腺上皮细胞和MCF-7细胞,利用双荧光素酶系统检测不同片段的启动活性。结果表明,克隆得到FASN基因的启动调控序列2 589bp,生物信息学分析发现,该启动子序列含有典型的启动转录元件TATA-box和E-box,分别位于转录起始位点(+1)上游-41和-74bp处。报告基因分析表明,启动子核心区域定位在-293~-79bp,在线软件预测发现,该区域含有Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子结合位点。结果显示,FASN基因启动子前端存在负调控元件,Sp1、NF-Y、USF和SREBP等转录因子可能参与FASN基因的转录调控。