化学激活和季节对克隆猪出生率的影响

作     者：马育芳 卫恒习 李燕 李秋艳 方锐 赵蕊 张坤 薛恺 娄颜坤 戴蕴平 连林生 李宁 

作者机构：中国农业大学农业生物技术国家重点实验室北京100193 中国农业大学动物科技学院北京100193 北京济普霖生物技术有限公司北京100193 

出 版 物：《中国科学（C辑）》 (Science in China(Series C))

年 卷 期：2009年第39卷第4期

页      面：384-391页

核心收录：

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-作物学] 0836[工学-生物工程] 090102[农学-作物遗传育种] 

基　　金：国家重点基础研究发展计划(批准号:G20000161)资助项目 

主　　题：孤雌激活 化学激活 体细胞核移植 克隆猪 季节 

摘      要：为了解化学激活对克隆猪出生效率的影响,研究了体外成熟的猪卵母细胞被激活恢复减数分裂到克隆猪出生的整个过程.首先研究了电激活(Ele),Ele+CHX+CB和Ele+6-DMAP3种激活方法对猪卵母细胞孤雌激活(parthenogenetic,PA)和核移植(nucleartransfer,NT)重构胚体外发育的影响.比较了Ele或Ele+CHX+CB激活方法对克隆猪出生效率的影响.实验中单独列出了PA胚的扩张囊胚率或NT优质囊胚率来代表囊胚的质量.结果表明:化学联合激活提高了PA的囊胚率和扩张囊胚率,但对PA胚的卵裂率和囊胚细胞数没有显著影响(P0.05).Ele+6-DMAP对PA胚的囊胚率和扩张囊胚率有显著提高(P0.05),但对NT胚的囊胚率和优质囊胚率没有提高甚至降低了NT胚的发育.Ele+CHX+CB虽然提高了NT胚的囊胚率(P0.05),但对优质囊胚率没有影响.Ele+CHX+CB激活方法使克隆猪出生率有所提高但不显著.本文还研究了季节对猪孤雌发育和克隆猪出生率的影响.结果表明,春季收集的猪卵母细胞使用3种激活方法卵母细胞的孤雌囊胚率均高于冬季收集的猪卵母细胞的囊胚率.春季和冬季进行移植,克隆猪出生率没有区别.综上,在PA中获得的结果与NT胚中获得的结果不一定完全匹配,说明孤雌激活和重构胚的激活机制还是有区别的.化学联合激活虽然能提高囊胚率,但它的作用相当于降低囊胚形成的门槛,却不是从本质上改变囊胚发育能力,因此不能显著提高克隆猪出生效率.春季收集的卵母细胞在体外培养中的发育能力好于冬季收集的卵母细胞,但季节对克隆猪出生率没有显著影响.